典型文献
长链非编码RNA ZEB1-AS1通过HMGB1/TLR-4信号轴加剧大鼠脑缺血/再灌注损伤
文献摘要：
目的 探讨长链非编码RNA ZEB1-AS1在脑缺血/再灌注损伤(CI/RI)中的作用及其机制.方法 通过脑中动脉闭塞构建雄性SD大鼠局灶性CI/RI模型,实时定量PCR和Western blot分别检测ZEB1-AS1和HMGB1的时序表达并确定了CI/RI最佳时间(2 h/24 h).将大鼠分为Sham组、CI/RI组、CI/RI+si-NC组、CI/RI+si-ZEB1-AS1组、CI/RI+OE-NC组、CI/RI+OE-ZEB1-AS1组.向CI/RI大鼠侧脑室注射ZEB1-AS1沉默/过表达载体及对照载体后,通过神经功能缺损评分和转盘实验分析认知功能;干湿重法分析脑水含量;Western blot检测白蛋白水平以评价血脑屏障完整性;ELISA法分析脑脊液和血清IL-1β和TNF-α水平.分别用FJC和TUNEL法检测CI/RI大鼠皮层中神经元丢失和细胞凋亡情况,Western blot分析HMGB1和TLR-4水平.此外,体外建立SH-SY5Y细胞氧-糖剥夺/复氧模型来模拟缺血/再灌注微环境,TUNEL法、Hoechst 33258染色、流式细胞术检测ZEB1-AS1沉默对神经元凋亡的影响;Western blot分析HMGB1和TLR-4水平.结果 qPCR和Western blot结果显示,ZEB1-AS1和HMGB1在CI/RI大鼠脑组织中的表达随着再灌注时间的延长升高(24 h达到峰值),而后逐渐降低.神经功能缺损评分和转盘试验结果显示,与OE-NC组相比,ZEB1-AS1过表达加重了CI/RI大鼠认知功能受损(P<0.05);而si-ZEB1-AS1组大鼠的认知功能则好于si-NC组(P<0.01).OE-ZEB1-AS1组大鼠的脑水含量高于OE-NC组(P<0.05);而与si-NC组相比,si-ZEB1-AS1组大鼠的脑水含量减少(P<0.01).血脑屏障渗漏检测数据提示,si-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液中白蛋白的含量低于si-NC组(P<0.01);OE-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液中的白蛋白含量则高于OE-NC组(P<0.05).ELISA结果显示,si-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液和血清IL-1β和TNF-α水平低于si-NC组(P<0.01);而OE-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液和血清IL-1β和TNF-α含量高于OE-NC组(P<0.01).OE-ZEB1-AS1组大鼠皮层FJC阳性神经元数量高于OE-NC组(P<0.01);与此相反,si-NC组相比,ZEB1-AS1敲减则降低了FJC阳性神经元数量(P<0.01).Western blot结果显示,与OE-NC组相比,ZEB1-AS1过表达促进了HMGB1和TLR-4水平(P均<0.01);而ZEB1-AS1敲减则产生相反的结果(P<0.01).细胞水平上,与si-NC组相比,ZEB1-AS1敲减降低了TUNEL阳性细胞数(P<0.01);流式细胞术检测结果进一步证实该现象.此外,Western blot结果进一步证实,ZEB1-AS1敲减下调了HMGB1和TLR-4水平(P均<0.01).结论 长链非编码RNA ZEB1-AS1通过HMGB1/TLR-4信号轴加剧脑缺血/再灌注损伤.
文献关键词：
脑缺血/再灌注损伤;长链非编码RNA ZEB1-AS1;高迁移率族蛋白1;Toll样受体4
中图分类号：
作者姓名：
王静;陈雪祎;孙丽;陈雪梅;李慧;熊彬睿;王海华
作者机构：
皖南医学院基础医学院,安徽 芜湖 241002;皖南医学院研究生学院,安徽 芜湖 241002;皖南医学院药学院,安徽 芜湖 241002
文献出处：
引用格式：
[1]王静;陈雪祎;孙丽;陈雪梅;李慧;熊彬睿;王海华-.长链非编码RNA ZEB1-AS1通过HMGB1/TLR-4信号轴加剧大鼠脑缺血/再灌注损伤)[J].南方医科大学学报,2022(08):1134-1142
A类：
RI+si,RI+OE
B类：
长链非编码,ZEB1,AS1,HMGB1,TLR,脑缺血,再灌注损伤,脑中动脉,动脉闭塞,局灶性,实时定量,blot,时序表达,Sham,NC,侧脑室注射,过表达载体,神经功能缺损评分,转盘,干湿,湿重,水含量,白蛋白水平,血脑屏障,脑脊液,FJC,TUNEL,皮层,SH,SY5Y,剥夺,复氧,微环境,Hoechst,流式细胞术,神经元凋亡,qPCR,大鼠脑组织,再灌注时间,达加,认知功能受损,渗漏检测,检测数据,蛋白含量,与此相反,敲减,阳性细胞,减下,高迁移率族蛋白,Toll,样受体
AB值：
0.172209
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