典型文献
叶酸缺乏抑制Brachyury表达的表观调控机制及其对拟胚体分化的影响
文献摘要：
目的 探讨叶酸缺乏抑制发育关键基因Brachyury表达的表观调控机制及对拟胚体(embryoid bodies,EBs)分化的影响.方法 建立叶酸缺乏的小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESCs)分化为EBs的细胞模型.根据叶酸浓度分为3组:正常组,叶酸缺乏组和叶酸补充组.采用massARRAY和RT-PCR分别检测EBs中Brachyury基因的甲基化和表达水平,明确叶酸缺乏对Brachyury 基因表达的影响;RT-PCR和ChIP-qPCR分别检测DNA甲基化酶的表达和组蛋白甲基化修饰,探讨叶酸缺乏对Brachyury基因的表观调控机制;检测多潜能markers和三胚层markers的表达,探讨发育关键基因Brachyury表达异常对EBs分化的影响.结果 ①在叶酸缺乏的ESCs分化为EBs模型中Brachyury表达显著降低,叶酸缺乏组的相对表达量为正常组的(0.19±0.08)倍,叶酸补充后上升至正常组的(0.62±0.14)倍.EBs中Brachyury基因启动子区甲基化水平从正常组的(30.75±0.50)％升高至叶酸缺乏组的(37.93±1.24)％,补充叶酸后则降低至(31.88±2.67)％.②DNA从头甲基化酶
DNMT3b表达升高,叶酸缺乏组其相对表达量为正常组的(1.59±0.31)倍.叶酸缺乏的EBs中H3K27me3修饰增加,正常组、叶酸缺乏组、叶酸补充组的相对富集程度分别为(0.22±0.03)、(0.32±0.02)、(0.24±0.01).③在叶酸缺乏ESCs分化为EBs后,细胞形态发生改变:EBs小球体积变小,形态不规则;叶酸补充后EBs小球体积接近正常,呈规则的球体结构.④ESCs多潜能性markers包括Nanog和Sox2表达显著上调,其相对表达量在叶酸缺乏组的EBs中分别为正常组的(3.18±0.95)和(4.23±1.59)倍;叶酸缺乏的EBs中外胚层marker Fgf5和中胚层marker Gsc表达量显著下调,分别为正常组的(0.42±0.04)倍和(0.61±0.20)倍.结论 叶酸缺乏通过DNA甲基化和组蛋白H3K27甲基化的双重表观调控作用,引起Brachyury基因的表达显著下调,最终导致拟胚体EBs的分化受阻.
文献关键词：
叶酸;Brachyury;表观遗传调控;DNA甲基化;组蛋白修饰
中图分类号：
作者姓名：
常韶燕;郭九叶;陈燕;王理
作者机构：
100020北京,首都儿科研究所,儿童发育营养组学北京市重点实验室;100026北京,朝阳区妇幼保健院儿科;266033山东青岛,青岛市海慈医疗集团泌尿外科
文献出处：
引用格式：
[1]常韶燕;郭九叶;陈燕;王理-.叶酸缺乏抑制Brachyury表达的表观调控机制及其对拟胚体分化的影响)[J].陆军军医大学学报,2022(14):1401-1409
A类：
EBs,massARRAY,
DNMT3b,Fgf5,Gsc
B类：
叶酸缺乏,Brachyury,表观调控,调控机制,拟胚体,制发,关键基因,embryoid,bodies,小鼠胚胎干细胞,embryonic,stem,cell,ESCs,细胞模型,酸浓度,ChIP,qPCR,甲基化酶,组蛋白甲基化,甲基化修饰,markers,相对表达量,至正,基因启动子区,启动子区甲基化,甲基化水平,从头,H3K27me3,细胞形态,形态发生,球体,多潜能性,Nanog,Sox2,外胚层,中胚层,表观遗传调控,组蛋白修饰
AB值：
0.195075
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