典型文献
碱基切除修复基因Lig3对小鼠胚胎神经发育的影响
文献摘要：
目的:DNA连接酶Ⅲ(DNA ligase Ⅲ,Lig3)基因是碱基切除修复通路中的关键基因,在胚胎发育过程中发挥重要作用,通过研究Lig3基因在叶酸代谢障碍状态下的表达情况,探讨其对小鼠胚胎神经发育的影响.方法:采用无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6J成年小鼠(8-9周,18-20 g),雌雄1:1合笼,孕鼠随机分为实验组和对照组,孕7.5天实验组腹腔注射4.5 mg/kg体重甲氨蝶吟(Methotrexate,MTX,二氢叶酸还原酶抑制剂)诱导产生叶酸代谢障碍的小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTDs)模型,对照组腹腔注射等体积的生理盐水.孕10.5天体视显微镜下观察胎鼠的发育情况.同时利用200nM的MTX建立叶酸代谢障碍的小鼠神经干细胞模型.在模型建立成功的基础上,应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real time quantita-tive PCR,RT-qPCR)及免疫印迹(Western blot)等方法研究碱基切除修复通路相关基因Lig3的表达水平.结果:4.5 mg/kg体重MTX处理孕鼠后胎鼠NTDs的发生率为31.1％(19/61),而正常对照组未见胎鼠NTDs的发生.在体视显微镜下可见NTDs胎鼠神经管未闭合,而正常胎鼠发育完好.RT-qPCR检测发现叶酸代谢障碍小鼠NTDs胚胎神经组织中Lig3mRNA的表达水平明显低于对照组(P＜0.05).Western blot检测发现,与对照组相比,叶酸代谢障碍NTDs胎鼠神经组织中Lig3蛋白水平明显降低(P＜0.05).同时,在MTX处理的神经干细胞中,Lig3的表达水平明显低于对照组(P＜0.05).对凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3进行检测发现MTX处理后的NTDs胎鼠神经组织及细胞模型中其表达均明显增加,表明细胞凋亡增加.结论:在叶酸代谢障碍前提下,Lig3表达降低,DNA修复功能减弱,细胞凋亡增加,导致NTDs的发生,为NTDs及出生缺陷的防控提供新思路.
文献关键词：
甲氨蝶吟;叶酸;神经管畸形;DNA修复
中图分类号：
作者姓名：
李正莉;官臻;朱智强;王建华;王秀伟
作者机构：
首都儿科研究所附属儿童医院呼吸科 北京100020;首都儿科研究所儿童发育营养学组北京市重点实验室 北京100020
文献出处：
引用格式：
[1]李正莉;官臻;朱智强;王建华;王秀伟-.碱基切除修复基因Lig3对小鼠胚胎神经发育的影响)[J].现代生物医学进展,2022(11):2008-2012
A类：
碱基切除修复基因,Lig3,200nM,Lig3mRNA
B类：
小鼠胚胎,神经发育,连接酶,ligase,复通,关键基因,胚胎发育,叶酸代谢障碍,病原体,specific,pathogen,free,SPF,C57BL,6J,成年小鼠,雌雄,孕鼠,腹腔注射,甲氨蝶吟,Methotrexate,MTX,二氢叶酸,还原酶,酶抑制剂,生叶,神经管畸形,neural,tube,defects,NTDs,生理盐水,天体,体视显微镜,显微镜下,胎鼠,发育情况,神经干细胞,细胞模型,立成,实时荧光定量聚合酶链反应,Real,quantita,tive,qPCR,免疫印迹,blot,正常对照,未闭合,完好,神经组织,凋亡相关蛋白,Cleaved,caspase,明细,修复功能,出生缺陷
AB值：
0.238214
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