典型文献
MiR-375抑制的人诱导多能干细胞分化为起搏样细胞的研究
文献摘要：
目的 探讨抑制miR-375表达能否使其修饰的人诱导多潜能干细胞(hiPSC)在向hiPSC源性心肌细胞(hiP-SC-CMs)分化的过程中更高效地向起搏样细胞转化.方法 采用hiPSC时序性激活或抑制Wnt信号通路定向诱导分化到hiPSC-CMs,流式分析检测其分化效率.分别转染携带miR-375抑制剂和绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒rLV-ZsGreen-Puro-hsa-mir-375 inhibitor(miR-375组)和等量带GFP的空载慢病毒(GFP组),空白组不做转病毒处理(Null组).分化14 d后在倒置显微镜下计算各组细胞每分钟搏动次数,采用实时荧光聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹检测三组起搏细胞发育相关转录因子(Shox2、Nkx2.5、Isl1)、起搏相关离子通道超极化激活环核苷酸门控通道4型(HCN4)mRNA和蛋白水平变化,采取免疫荧光法检测GFP组和miR-375组Shox2蛋白和心肌细胞特异性标志物心肌肌钙蛋白T(cTNT)的表达.结果 分化第7 d起可见细胞自发性搏动,流式分析结果cTNT阳性率超80％,hiPS-Cs成功诱导分化到hiPSC-CMs;与GFP组和Null组比较,miR-375组搏动速度及Shox2、HCN4、Isl1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,Nkx2.5表达明显降低(P<0.05);荧光显微镜观察miR-375组Shox2蛋白表达强于GFP组,cTNT蛋白表达两组无显著差异.结论 通过抑制miR-375表达能增加hiPSCs向起搏样细胞的分化效率.
文献关键词：
心血管病学;微小核糖核酸-375;人诱导多潜能干细胞;慢病毒载体;矮小身材同源异型框基因2;心肌细胞;生物起搏
中图分类号：
作者姓名：
章澜;杨媚;王晞;唐艳红;宋思维;陈玉婷;王腾;黄从新
作者机构：
武汉大学人民医院心内科 武汉大学心血管病研究所 心血管病湖北重点实验室,湖北武汉 430060
文献出处：
引用格式：
[1]章澜;杨媚;王晞;唐艳红;宋思维;陈玉婷;王腾;黄从新-.MiR-375抑制的人诱导多能干细胞分化为起搏样细胞的研究)[J].中国心脏起搏与心电生理杂志,2022(02):148-154
A类：
hiP,Isl1,hiPS
B类：
MiR,人诱导多能干细胞,细胞分化,miR,人诱导多潜能干细胞,心肌细胞,CMs,细胞转化,时序性,Wnt,诱导分化,流式分析,分析检测,转染,绿色荧光蛋白,GFP,rLV,ZsGreen,Puro,hsa,mir,inhibitor,等量,空载,转病,Null,倒置,显微镜下,每分钟,搏动,实时荧光聚合酶链式反应,蛋白质免疫印迹,组起,起搏细胞,细胞发育,Shox2,Nkx2,离子通道,超极化,环核苷酸,门控通道,HCN4,水平变化,免疫荧光法,细胞特异性,心肌肌钙蛋白,cTNT,自发性,蛋白表达水平,荧光显微镜观察,hiPSCs,细胞的分化,心血管病学,微小核糖核酸,慢病毒载体,矮小,身材,异型,生物起搏
AB值：
0.333551
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
