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UDG在两种水生动物病毒核酸片段检测中的抗污染效果研究
文献摘要：
尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)作为生物体内的DNA修复酶系,能有效水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,可用于PCR过程中残留污染物的清除.本研究以PCR预混液试剂盒作为检测工具,以鲤浮肿病和罗非鱼湖病的阳性核酸片段检测为例,探讨了巢式和荧光定量PCR检测时,UDG的抗污染效果.研究结果表明:(1)向PCR反应体系中添加200μmol/L的dUTP,可保证扩增产物中有足够的尿嘧啶掺入,且对扩增效率影响较小.(2)使用0.2 U/10μL的UDG浓度,可清除常规PCR中99.9％以上(多数大于99.95％)的阳性污染物,或清除荧光定量PCR(探针法)中96.5％以上的阳性污染物.继续增加UDG用量,则污染物清除效率的提高有限.本研究为特定条件下UDG对污染性模板的清除效果做了定量统计,能为该技术的具体应用与进一步优化提供实验依据.
文献关键词：
PCR;UDG;抗污染;水生动物病毒;核酸片段;检测
中图分类号：
作者姓名：
陈凡;丁能水;李奕雅;汪小东;许弟群
作者机构：
闽南师范大学生物科学与技术学院,福建漳州363000;福建傲农生物科技集团股份有限公司,福建漳州363000;闽南师范大学体育学院,福建漳州363000
文献出处：
引用格式：
[1]陈凡;丁能水;李奕雅;汪小东;许弟群-.UDG在两种水生动物病毒核酸片段检测中的抗污染效果研究)[J].闽南师范大学学报（自然科学版）,2022(01):84-92
A类：
UDG,水生动物病毒,鲤浮肿病,阳性污染物
B类：
病毒核酸,核酸片段,抗污染,尿嘧啶,糖基化,生物体,单链,双链,预混,试剂盒,检测工具,罗非鱼,反应体系,dUTP,扩增产物,掺入,探针法,清除效率,特定条件,污染性,清除效果,定量统计
AB值：
0.228269
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