目的 探讨糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞(LEC)高表达的miR-124在糖尿病性白内障病理反应中的作用及机制.方法 收集糖尿病性白内障患者与健康捐献眼的晶状体前囊膜,并通过高通量测序技术对晶状体前囊膜中的miRNA进行检测.使用EdgeR,利用F检验筛选差异表达miRNA.使用RegRNA检测差异表达miRNA和靶基因的结合关系以及结合位点,并进一步使用qRT-PCR验证miR-124和Bcl-2表达量的相关性.采用人LEC细胞分别转染dsControl、miR-124 inhibitor、dsBcl-2-640、miR-124 inhibitor+dsBcl-2-640,使用Western Blot检测Bcl-2表达量的变化;将各组细胞置于35.5 mmol·L-1高糖环境中培养48 h,利用流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 糖尿病性白内障眼和健康对照眼miR-124丰度值分别为281208和64669(变化倍数为2.26,P<0.05),是上调最为显著的miRNAs之一.生物信息学分析显示miR-124可与Bcl-2启动子序列中相对于转录起始位点的核苷酸-645处序列结合.qRT-PCR检测结果表明miR-124与Bcl-2表达量呈负相关性(r=-0.8729,P=0.0237).与空白对照组相比,dsBcl-2-640组LEC细胞Bcl-2蛋白表达显著降低[(0.22±0.03)比(0.41±0.04),P<0.05],miR-124 inhibitor组显著升高[(0.91±0.09)比(0.41±0.04),P<0.05],而miR-124 inhibitor+dsBcl-2-640组无明显差异[(0.37±0.03)比(0.41±0.04),P>0.05].与空白对照组相比,miR-124 inhibitor组LEC细胞凋亡率显著降低[(11.33±1.86)％比(25.81±2.33)％,P<0.05],dsBcl-2-640组显著增加[(32.30±4.54)％比(25.81±2.33)％,P<0.05],而miR-124 inhibitor+dsBcl-2-640组无明显差异[(23.20±4.30)％比(25.81±2.33)％,P>0.05)].结论 糖尿病性白内障患者LEC高表达的miR-124可靶向Bcl-2启动子序列诱导LEC细胞凋亡.

糖尿病性白内障;miR-124;Bcl-2;高通量筛选;凋亡

陈祎祎;彭建军

武汉科技大学附属普仁医院眼科,武汉 430081

南昌大学学报（医学版）

[1]陈祎祎;彭建军-.miR-124诱导糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞凋亡的作用及机制)[J].南昌大学学报（医学版）,2022(01):9-15

dsControl,dsBcl,inhibitor+dsBcl

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