典型文献
极端古细菌来源糊精脱支酶的生物信息学分析与高效制备
文献摘要：
[目的]丰富淀粉脱支酶酶制剂种类,充分利用淀粉质资源,实现葡萄糖、麦芽糖、环糊精等淀粉深加工产品的高效制备,开发挖掘一种来源于极端古细菌Thermococcus gammatolerans(以下简写为T.gammatolerans)的糊精脱支酶基因.[方法]利用多种生物信息学分析工具对T.gammatolerans糊精脱支酶进行理化性质分析和结构预测;利用分子生物技术实现T.gammatolerans糊精脱支酶在大肠杆菌中的胞外分泌表达,并通过优化发酵温度、发酵时间以及诱导剂添加量来提高酶产量.[结果]T.gammatolerans糊精脱支酶是一种稳定性较高的亲水蛋白质,其氨基酸序列中不包含信号肽;将酶的DNA序列构建至含信号肽的pET?20b(+)载体中可实现T.gammatolerans糊精脱支酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达和胞外分泌.T.gammatolerans糊精脱支酶的最优发酵条件为:将37℃温度条件下培养12 h的种子液接种到TB培养基中,在添加终浓度为0.01 mmol/L的异丙基?β?D?硫代半乳糖苷(isopropyl?β?D?thiogalactoside,IPTG)后,在25℃温度条件下进行84 h诱导表达.在该条件下T.gammatolerans糊精脱支酶的胞外酶活力达到了326.0 U/mL,为重组酶初始活力的1.36倍.[结论]T.gammatolerans糊精脱支酶具有优良的理化性质和较高的表达水平,在淀粉糖工业生产中具有潜在应用价值.
文献关键词：
糊精脱支酶;极端古细菌;生物信息学分析;异源表达;高效制备
中图分类号：
作者姓名：
王璐潇;王亚梅;班宵逢;李才明;顾正彪;李兆丰
作者机构：
江南大学食品学院,江苏无锡 214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡 214122;江南大学江苏省食品安全与质量控制协同创新中心,江苏无锡 214122
文献出处：
引用格式：
[1]王璐潇;王亚梅;班宵逢;李才明;顾正彪;李兆丰-.极端古细菌来源糊精脱支酶的生物信息学分析与高效制备)[J].长沙理工大学学报（自然科学版）,2022(04):99-107
A类：
极端古细菌,糊精脱支酶,gammatolerans
B类：
生物信息学分析,高效制备,酶制剂,淀粉质,麦芽糖,环糊精,深加工产品,Thermococcus,简写,酶基因,性质分析,结构预测,生物技术,大肠杆菌,胞外分泌,分泌表达,优化发酵,发酵温度,发酵时间,诱导剂,亲水蛋白质,氨基酸序列,信号肽,pET,20b,BL21,DE3,最优发酵条件,温度条件,TB,异丙基,半乳糖,糖苷,isopropyl,thiogalactoside,IPTG,诱导表达,该条,胞外酶,酶活力,力达,重组酶,淀粉糖,潜在应用,异源表达
AB值：
0.244223
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