目的 基于蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的大鼠肝窦内皮细胞(LSEC)增殖、迁移和成管能力的影响.方法 制备黄芪汤含药血清,体外分离、培养SD大鼠LSEC,将大鼠LSEC随机分为空白组,VEGF组,血清对照组,低、中、高剂量黄芪汤含药血清组,利用噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell实验、成管实验分别检测各组LSEC增殖、迁移和成管能力,通过Western Blot法检测血小板-内皮细胞黏附分子-1(CD31)、内皮素-1(ET-1)、内皮性一氧化氮合酶(eNOS)和AKT/mTOR信号通路中AKT、磷酸化(p)-AKT、mTOR、磷酸化(p)-mTOR蛋白表达水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey's检验.结果 与空白组相比,VEGF组、血清对照组能够促进大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生(P值均＜0.05);Western Blot结果显示,CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达显著升高(P值均＜0.05).VEGF组与血清对照组比较,上述指标差异均无统计学意义(P值均＞0.05).与血清组比较,黄芪汤中、高剂量组能显著抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生(P值均＜0.05);Western Blot结果显示,CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达均显著降低(P值均＜0.05).结论 较高剂量黄芪汤含药血清能抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和成管能力,其作用机制可能与调控AKT/mTOR信号通路有关.

肝硬化;黄芪;肝窦内皮细胞;大鼠;Sprague-Dawley

王浩艺;麦静愔;平键;成扬

上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海201203;上海市光华中西医结合医院治未病科,上海200052;上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室,上海201203;上海市中医临床重点实验室,上海201203

临床肝胆病杂志

[1]王浩艺;麦静愔;平键;成扬-.黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子诱导的大鼠肝窦内皮细胞增殖、迁移和成管能力的影响及其作用机制)[J].临床肝胆病杂志,2022(10):2279-2285

黄芪汤,含药血清,血管内皮生长因子,肝窦内皮细胞,内皮细胞增殖,成管能力,蛋白激酶,AKT,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,mTOR,VEGF,LSEC,外分,高剂量,噻唑蓝,MTT,比色法,Transwell,成管实验,Blot,细胞黏附分子,CD31,内皮素,ET,一氧化氮合酶,eNOS,磷酸化,蛋白表达水平,单因素方差分析,Tukey,血管新生,肝硬化,Sprague,Dawley

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