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无机离子对磷硫修饰DNA的碘催化断裂反应的显著影响
文献摘要：
磷硫修饰DNA(PT-DNA)的断裂反应常被用于检测微生物基因组中PT-DNA的含量,但其检测准确性有待提高.本文研究了Tris-HCl、HEPES、磷酸盐等缓冲溶液和阳离子的种类、浓度对碘断裂PT-DNA的影响,提出了Tris分子参与断裂反应的机制.研究发现,Tris分子能使单链PT-DNA的断裂收率从5％提升至70％以上.对于单链PT-DNA断裂,Na+、Mg2+和Ca2+等阳离子有显著的抑制作用;而双链PT-DNA断裂基本不受上述无机阳离子的影响.当用磷酸钠缓冲溶液代替Tris-HCl时,在低盐条件下PT-DNA只能产生微弱断裂,在高盐条件下双链状态PT-DNA的断裂反而获得了显著的提升;而改用HEPES缓冲液时,无论在高盐还是低盐条件下,PT-DNA的断裂效率都很低.研究结果表明,只有Tris分子结合了PT-DNA氧化后形成的亚磺酸基团才能实现高效断裂,而阳离子可通过调节Tris分子同亚磺酸基团的结合来影响断裂收率.PT-DNA的生物学功能可能是防止弱氧化剂对DNA的破坏(包括断裂或变异),并通过氧化应激启动抗氧化机制.本研究结果还表明,核酸药物在体内可能经氧化途径代谢或脱硫后被核酸酶分解,开发磷硫修饰的核酸类药物时需要考虑这一药物的代谢因素.
文献关键词：
磷硫修饰DNA;碘氧化;核酸药物;基因保护;阳离子
中图分类号：
作者姓名：
胡坤灵;汤若冰;安然;梁兴国
作者机构：
中国海洋大学食品科学与工程学院,山东 青岛266003;青岛海洋科学与技术试点国家实验室 海洋药物与生物制品功能实验室,山东 青岛266237
文献出处：
引用格式：
[1]胡坤灵;汤若冰;安然;梁兴国-.无机离子对磷硫修饰DNA的碘催化断裂反应的显著影响)[J].中国海洋大学学报（自然科学版）,2022(10):68-75
A类：
B类：
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AB值：
0.366838
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