典型文献
基于多重实时荧光PCR技术快速检测海产品异尖线虫
文献摘要：
[目的]构建简单异尖线虫(Anisakis simplex)、费氏宫脂线虫(Hysterothylacium fabri)、内弯宫脂线虫(Hysterothylacium aduncum)、拟地新线虫(Pseudoterranova decipiens)、典型异尖线虫(Anisakis typica)、带鱼针蛔线虫(Raphidascaris trichiuri)、厦门宫脂线虫(Hysterothylacium amoyense)和中华宫脂线虫(Hysterothylacium sinense)的快速检测方法,实现对以上8种异尖线虫的高通量检测及准确分型.[方法]采集8种异尖线虫核酸进行凝胶电泳,测序并进行序列对比,设计引物和TaqMan荧光探针;通过优化体系及退火温度,建立多重实时荧光PCR检测体系,并添加海产品核酸背景验证其特异性和灵敏度.[结果]建立了基于多重实时荧光PCR技术针对海产品中异尖线虫的快速检测鉴定方法,可在一个反应体系里同时检测鉴定4种异尖线虫,双通道反应体系可一次性检测鉴定8种异尖线虫.体系中,引物和探针的终浓度分别为0.60、0.20μmol/L,DNA灵敏度为103拷贝/mL;对带鱼(Trichiurus lepturus)、鳕鱼(Gadus)、舟山宫脂线虫(Hysterothylacium zhoushanensis)、棘颚口线虫(Gnathostoma spinigerum)均无荧光信号;针对等量混合的4种异尖线虫模拟样本均可检出,检出限为1.0％.[结论]建立的海产品异尖线虫多重实时荧光PCR快速检测方法操作简便、灵敏度高、特异性强、重复性好,可应用于日常食品检验和异尖线虫分型鉴别研究.
文献关键词：
异尖线虫;海产品;快速检测鉴定;多重实时荧光PCR
中图分类号：
作者姓名：
黄姝玲
作者机构：
福建省产品质量检验研究院,福建 福州 350002
文献出处：
引用格式：
[1]黄姝玲-.基于多重实时荧光PCR技术快速检测海产品异尖线虫)[J].广东海洋大学学报,2022(06):122-129
A类：
Hysterothylacium,aduncum,Pseudoterranova,typica,Raphidascaris,trichiuri,amoyense,快速检测鉴定,zhoushanensis,Gnathostoma,spinigerum
B类：
测海,海产品,异尖线虫,Anisakis,simplex,fabri,新线,decipiens,带鱼,华宫,sinense,快速检测方法,高通量检测,凝胶电泳,引物,TaqMan,荧光探针,优化体系,退火温度,检测体系,鉴定方法,反应体系,系里,同时检测,双通道,拷贝,Trichiurus,lepturus,鳕鱼,Gadus,舟山,荧光信号,等量,模拟样本,检出限,灵敏度高,食品检验
AB值：
0.253157
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