目的:肝癌是全球第6大常见的恶性肿瘤,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占所有肝癌患者的85％～90％.HCC具有起病隐匿、进展快、复发早、易耐药和预后差的临床特点.中心体相关激酶2(NIMA related kinase 2,NEK2)是细胞周期调控蛋白激酶,在有丝分裂中调节细胞周期.细胞衰老是一个复杂的异质过程,是一种稳定的细胞周期停滞形式,可限制细胞的增殖潜能.本研究旨在分析NEK2表达水平与肝癌细胞衰老的关系,探究NEK2对肝癌细胞衰老的影响及其分子机制.方法:从GenAge获得581个衰老相关基因,从癌症基因组图谱数据库下载370例HCC患者肿瘤组织的基因表达数据,利用R包分析NEK2与衰老相关基因的共表达情况.采用KEGG分析NEK2过表达的HEK293细胞差异基因的富集通路.在肝癌细胞SMMC-7721及HepG2中构建NEK2过表达及敲低的稳定转染细胞株,采用衰老相关的β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,蛋白质印迹法检测p53/p21、p16/Rb和第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)/Akt信号转导通路相关蛋白质的表达情况.结果:与NEK2共表达的衰老相关基因有320个.KEGG分析显示细胞衰老信号通路在NEK2过表达的HEK293细胞中存在显著富集.与未敲低NEK2的SMMC-7721或HepG2相比,敲低NEK2的SMMC-7721和HepG2衰老细胞增加,细胞增殖和克隆形成明显减少,G0/G1期细胞的百分比增加,磷酸化的Akt(phospho-Akt,p-Akt)和磷酸化的Rb(phospho-Rb,p-Rb)蛋白质表达水平明显降低,p16蛋白质表达水平明显升高(均P<0.05);与转染空白质粒的SMMC-7721或HepG2相比,过表达NEK2的SMMC-7721和HepG2衰老细胞减少,细胞增殖和克隆形成明显增加,G0/G1期细胞的百分比减少,p-Akt和p-Rb蛋白质表达水平明显升高,p16蛋白质表达水平明显降低(均P<0.05).结论:NEK2可能通过p16/Rb及PTEN/Akt信号转导通路介导肝癌细胞的抗衰老效应,为NEK2促进肝癌进展提供了新的实验依据,也为肝癌的靶向治疗提供了新思路.

肝癌;中心体相关激酶2;细胞衰老;细胞增殖;细胞周期

雷倩;夏机良;冯湘玲;郭姣姣;李官成;周文

中南大学基础医学院肿瘤研究所,长沙410078;中南大学湘雅医院血液科,长沙410008;中南大学湘雅公共卫生学院,长沙410078

中南大学学报（医学版）

[1]雷倩;夏机良;冯湘玲;郭姣姣;李官成;周文-.NEK2通过抵抗肝癌细胞衰老促进肝癌进展)[J].中南大学学报（医学版）,2022(02):153-164

GenAge

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