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黄瓜绿斑驳花叶病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测方法的建立
文献摘要:
黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的检疫性植物种传病毒,在世界各地均有发生,造成西瓜(Citrullus lanatus)、黄瓜(Cucumis sativus)、甜瓜(Cucumis melo)等作物的严重经济损失.CGMMV可由种子直接传播至下一代秧苗,为保障种子贸易顺利进行,有必要建立快速而准确的病毒检测方法.本研究以截获的带毒种子为材料,针对CGMMV建立了SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测方法,其中设计筛选特异、灵敏的引物是关键.利用多次筛选得到的引物对建立了SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测方法,实验结果表明该方法能够特异地检测CGMMV,不与其他侵染葫芦科植物的病毒发生交叉反应;灵敏度是RT-PCR方法的1000倍,是TaqMan探针实时荧光RT-PCR方法的100倍;且整个检测过程可在2.5 h内完成,是一种快速、灵敏、可靠的检测方法;应用该方法及TaqMan实时荧光RT-PCR方法同时对国内外198份种苗样品进行检测,结果显示kappa值大于0.82,说明两种方法具有高度一致性,本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR方法有效、可靠,为种子快速通关提供新的技术手段.
文献关键词:
黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV);SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR;种子;灵敏度;特异性
作者姓名:
田沂民;吴建祥;陈磊;罗金燕;滕凯;叶军;杜伟;于翠
作者机构:
上海海关动植物与食品检验检疫技术中心,上海200135;浙江大学农业与生物技术学院,杭州310058;上海农业技术推广服务中心,上海201103;上海海关动植物检疫监管处,上海200082;宁夏回族自治区农业技术推广总站,银川750001
引用格式:
[1]田沂民;吴建祥;陈磊;罗金燕;滕凯;叶军;杜伟;于翠-.黄瓜绿斑驳花叶病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测方法的建立)[J].农业生物技术学报,2022(08):1640-1648
A类:
B类:
黄瓜绿斑驳花叶病毒,SYBR,Green,Cucumber,green,mottle,mosaic,virus,CGMMV,检疫性,植物种,世界各地,西瓜,Citrullus,lanatus,Cucumis,sativus,甜瓜,melo,重经济,下一代,秧苗,种子贸易,顺利进行,病毒检测,截获,带毒,毒种,中设计,引物,选得,异地,侵染,葫芦科,交叉反应,TaqMan,个检,检测过程,种苗,kappa,高度一致,通关
AB值:
0.38026
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