典型文献
不同信号肽对嵌合抗原受体T细胞杀伤作用的影响研究
文献摘要：
背景与目的:信号肽(signal peptide,SP)是一段存在于前体蛋白N-端的短肽链,能够调节前体蛋白的折叠和转移,在蛋白质的分泌过程中扮演着极其重要的角色.近年来,靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞在白血病治疗中取得了重大突破,关于CAR结构的胞内域改造方面也有诸多研究,而对单链可变片段(scFv)的N端SP研究进展缓慢.探讨4种不同SP的CD19-CAR在T细胞表面表达及对CD19+靶细胞的杀伤作用.方法:通过基因合成和分子克隆技术,构建含4种不同SP(SP1、SP2、SP3、SP4)的靶向CD19抗原的CAR载体,进行慢病毒包装,将得到的慢病毒转染T细胞,利用流式细胞术检测细胞转染效率,采用钙黄绿素释放法检测该细胞对靶细胞的杀伤作用,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞因子IFN-γ和TNF-α的分泌水平.结果:成功构建4种不同SP的重组慢病毒载体,将4种慢病毒转导T细胞后,结果显示,分别有20.9％、22.6％、31.5％、38.6％的T细胞表面能够表达CD19-CAR(分别命名为SP1-CD19、SP2-CD19、SP3-CD19和SP4-CD19细胞),进一步杀瘤实验证明,SP4-CD19细胞对CD19+肿瘤细胞的杀伤作用显著高于SP1-CD19、SP2-CD19和SP3-CD19细胞(P<0.01),并且当效靶比为10:1共培养24 h后,与SP1-CD19、SP2-CD19和SP3-CD19细胞相比,SP4-CD19细胞的IFN-γ和TNF-α的分泌水平显著升高(P<0.05).此外,4种不同SP的CAR-T对CD19-肿瘤细胞K562的杀伤作用差异无统计学意义(P>0.05).结论:SP4-CD19细胞的转染效率、细胞因子分泌水平及对CD19+肿瘤细胞的杀伤作用均显著高于SP1-CD19、SP2-CD19和SP3-CD19细胞,该研究成果为CAR-T优化改造及其高效的临床应用奠定了科学基础.
文献关键词：
信号肽;嵌合抗原受体;靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor;CAR)T细胞;体外杀瘤;细胞因子
中图分类号：
作者姓名：
李帆;张琴星;童祥文;田高辉;顾力行;徐瑶
作者机构：
武汉科技大学生命科学与健康学院 生物医学研究院,湖北 武汉430081
文献出处：
引用格式：
[1]李帆;张琴星;童祥文;田高辉;顾力行;徐瑶-.不同信号肽对嵌合抗原受体T细胞杀伤作用的影响研究)[J].中国癌症杂志,2022(02):142-151
A类：
体外杀瘤
B类：
信号肽,嵌合抗原受体,杀伤作用,signal,peptide,短肽,肽链,节前,折叠,chimeric,antigen,receptor,CAR,白血病,重大突破,内域,单链,scFv,展缓,细胞表面,CD19+,靶细胞,基因合成,分子克隆,克隆技术,SP1,SP2,SP3,SP4,慢病毒包装,慢病毒转染,流式细胞术,细胞转染,转染效率,钙黄绿素,对靶,酶联免疫吸附实验,enzyme,linked,immunosorbent,assay,IFN,泌水,重组慢病毒,慢病毒载体,转导,表面能,肿瘤细胞,共培养,K562,作用差异,细胞因子分泌,优化改造,科学基础
AB值：
0.262906
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
