目的 探讨超顺磁性脂质体载血管内皮细胞生长因子(VEGF)沉默基因对骨肉瘤细胞影响.方法 制备磁性脂质体,检测脂质体磁性和Zeta电位,透射电镜观察脂质体形态.骨肉瘤细胞143 B分成空白对照组(常规培养)、阴性对照组(磁性脂质体转染siRNA control)、Lip 2000-VEGF组(Lipofectamine 2000转染siRNA VEGF)、MCLs组(磁性脂质体转染siRNA VEGF).噻唑蓝(MTT)法检测增殖,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测VEGF mRNA,蛋白质印迹(Western blot)法检测VEGF蛋白表达,流式细胞术测定凋亡,划痕愈合实验检测划痕愈合能力,Transwell小室检测侵袭和迁移.结果 随着磁场强度的不断增加,磁性脂质体磁化强度也明显增加;磁性脂质体Zeta电位测定结果为正电位.脂质体呈圆形或椭圆形,分布均匀,分散性较好.空白对照组、阴性对照组、Lip 2000-VEGF组、MCLs组VEGF mRNA表达水平为1.00±0.01,1.05±0.03,0.43±0.02,0.24±0.01,VEGF蛋白表达水平为1.00±0.01,1.03±0.01,0.66±0.02,0.46±0.02;细胞光密度值(增殖活性)为1.97±0.12,2.01±0.21,1.51±0.12,0.96±0.10;凋亡率为(4.97±0.06)％,(6.25±0.09)％,(12.08±0.11)％,(21.15±0.12)％;划痕愈合率为(95.43±0.21)％,(86.10±0.21)％,(45.25±0.09)％,(26.69±0.20)％;细胞迁移数目为(1241.33±3.51),(1154.67±8.14),(736.33±6.43),(416.00±7.00)个;细胞侵袭数目为(986.33±5.03),(1007.33±8.02),(574.67±12.90),(248.33±7.51)个.上述指标,Lip 2000-VEGF组、MCLs组与Control比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);MCLs组与Lip 2000-VEGF组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 超顺磁性脂质体载VEGF沉默基因抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡.

磁性脂质体;血管内皮细胞生长因子;骨肉瘤;迁移;凋亡

黄涛;罗聪;罗玉佳;陈韬;余杰

重庆医科大学附属儿童医院,国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,重庆市干细胞治疗工程技术研究中心,骨科,重庆400014;重庆医科大学附属儿童医院,国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,重庆市干细胞治疗工程技术研究中心,神经外科,重庆400014

中国临床药理学杂志

[1]黄涛;罗聪;罗玉佳;陈韬;余杰-.超顺磁性脂质体载血管内皮细胞生长因子沉默基因对骨肉瘤细胞影响)[J].中国临床药理学杂志,2022(22):2693-2697

磁性脂质体,MCLs

顺磁性,血管内皮细胞生长因子,沉默基因,骨肉瘤细胞,VEGF,Zeta,透射电镜,电镜观察,空白对照,规培,脂质体转染,siRNA,control,Lipofectamine,噻唑蓝,MTT,逆转录聚合酶链反应,qRT,蛋白质印迹,blot,流式细胞术,划痕,实验检测,Transwell,小室,侵袭和迁移,磁场强度,磁化强度,测定结果,正电,呈圆形,椭圆形,分散性,蛋白表达水平,光密度值,增殖活性,凋亡率,愈合率,细胞迁移,迁移数,细胞侵袭,Control,基因抑制,迁移和侵袭

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