为研究双调蛋白(AREG)对绵羊卵丘细胞(Cumulus cells,CCs)葡萄糖代谢的影响,采集来源于中腔卵泡和小腔卵泡的卵丘-卵母细胞复合体(COCs),利用荧光定量PCR检测中、小腔卵泡卵丘细胞葡萄糖代谢相关基因表达;添加AREG进行卵丘细胞的体外培养和卵母细胞的体外成熟(IVM),检测卵丘细胞的增殖,测定培养液或细胞中的葡萄糖、乳酸、NADPH和ATP含量.结果表明:1)来源于小腔卵泡的卵丘细胞G6PDH、PFKL和PFKM的mRNA表达量以及细胞增殖能力显著低于中腔卵泡卵丘细胞(P＜0.05);2)较低浓度(10 ng/mL)的AREG显著提高了中腔卵泡卵丘细胞的增殖能力(P＜0.05)而对小腔卵泡卵丘细胞无影响(P＞0.05),在生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)的协同作用下,10 ng/mL AREG可以显著提高两者的增殖能力(P＜0.05)且两者间差异不显著(P＞0.05);3)在GDF9和BMP15的协同作用下,AREG可显著提高不同直径腔卵泡卵丘细胞培养液中的葡萄糖消耗、乳酸生成、NADPH生成以及细胞中的ATP含量(P＜0.05);4)小腔卵泡卵母细胞的IVM培养液中添加AREG+GDF9+BMP15,显著提高培养液中的葡萄糖消耗、乳酸生成及卵丘细胞中的ATP含量(P＜0.05)且显著高于中腔卵泡(P＜0.05),显著提高了卵母细胞中的NADPH生成及ATP含量(P＜0.05)且与中腔卵泡卵母细胞组差异不显著(P＞0.05).综上,在GDF9和BMP15的协同作用下,AREG可以增强绵羊卵丘细胞的葡萄糖代谢,并且对进行IVM的小腔卵泡COCs添加AREG+GDF9+BMP15可使其葡萄糖代谢达到中腔卵泡的水平.

卵丘细胞;AREG;葡萄糖代谢;绵羊;小腔卵泡

王兆琛;赵勇超;杜炜;张宇;张家新;安磊

内蒙古农业大学动物科学学院,呼和浩特010018;中国农业大学动物科学技术学院,北京100193

中国农业大学学报

[1]王兆琛;赵勇超;杜炜;张宇;张家新;安磊-.AREG对绵羊卵丘细胞葡萄糖代谢的影响)[J].中国农业大学学报,2022(11):130-139

小腔卵泡,AREG+GDF9+BMP15

绵羊,卵丘细胞,葡萄糖代谢,双调蛋白,Cumulus,cells,CCs,卵母细胞,复合体,COCs,代谢相关基因,相关基因表达,体外培养,体外成熟,IVM,细胞的增殖,培养液,NADPH,ATP,G6PDH,PFKL,PFKM,细胞增殖能力,生长分化因子,骨形态发生蛋白,不同直径,细胞培养,葡萄糖消耗

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