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组氨酸激酶AgrC在亚抑菌浓度环丙沙星促进金黄色葡萄球菌生物膜形成中的作用机制
文献摘要：
目的:探讨组氨酸激酶AgrC在亚抑菌浓度环丙沙星促进金黄色葡萄球菌生物膜形成中的作用机制，为金黄色葡萄球菌生物膜相关感染的治疗提供新的思路。方法:于2021年中南大学湘雅三医院检验科收集皮肤组织和体液标本，采用微量肉汤稀释法测定环丙沙星对实验菌株的最低抑菌浓度；采用结晶紫染色法观察不同亚抑菌浓度环丙沙星处理金黄色葡萄球菌后的生物膜形成情况；利用SYTO9和PI荧光染料分析亚抑菌浓度环丙沙星对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响；通过逆转录荧光定量PCR检测亚抑菌浓度环丙沙星对金黄色葡萄球菌
agrC基因及其调控基因
agrA、
icaA和
icaR的表达水平的影响；最后，通过等温滴定量热法验证亚抑菌浓度环丙沙星与AgrC蛋白受体的结合作用；数据采用
xˉ±s表示，服从正态分布和方差齐性则采用方差分析，否则采用非参数检验，以
P<0.05为差异有统计学意义。
结果:药敏试验结果显示环丙沙星对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.25~0.5 mg/L。亚抑菌浓度的环丙沙星可促进金黄色葡萄球菌生物膜的形成，在1/4倍最低抑菌浓度即可开始出现显著作用［ATCC 43 300（
t=7.42，
P=0.002）、临床菌株SA1（
t=5.42，
P=0.005）、SA2（
t=6.38，
P=0.002）、SA3（
t=4.8，
P=0.009）、SA4（
t=7.06，
P=0.002）和SA5（
t=4.36，
P=0.004）］。激光共聚焦显微镜观察发现亚抑菌浓度的环丙沙星可明显促进金黄色葡萄球菌生物膜的形成，增加生物膜的形成量并使生物膜显著聚集成三维立体结构。逆转录荧光定量PCR结果显示，亚抑菌浓度的环丙沙星对
agrC基因表达水平无显著影响，但使agr
A（
t=4.42，
P=0.003）和
icaR（
t=4.49，
P=0.007）表达水平下降［（0.61±0.24）和（0.56±0.12）］，
icaA表达水平升高［1.51±0.19（
t=5.24，
P=0.009）］，差异有统计学意义。等温滴定量热法分析发现，环丙沙星与AgrC蛋白受体具有较好的结合力。
结论:亚抑菌浓度环丙沙星可能通过结合AgrC蛋白受体，影响下游a
grA、
icaA和
icaR基因表达水平，从而促进生物膜形成，增加金黄色葡萄球菌的抗菌药物耐药性。
文献关键词：
葡萄球菌，金黄色;抗菌药;生物膜;实验室技术和方法
中图分类号：
作者姓名：
朱娟;李颖佳
作者机构：
中南大学湘雅三医院检验科，长沙 410013
文献出处：
引用格式：
[1]朱娟;李颖佳-.组氨酸激酶AgrC在亚抑菌浓度环丙沙星促进金黄色葡萄球菌生物膜形成中的作用机制)[J].中华检验医学杂志,2022(02):151-156
A类：
AgrC,SYTO9,agrC,icaR,SA4,agr
,grA
B类：
组氨酸,亚抑菌浓度,环丙沙星,金黄色葡萄球菌,生物膜形成,中南大学,大学湘,湘雅,医院检验科,皮肤组织,体液标本,微量肉汤稀释法,最低抑菌浓度,结晶紫,染色法,荧光染料,逆转录,调控基因,agrA,icaA,等温滴定量热法,服从,正态分布,方差齐性,否则,非参数检验,药敏试验,ATCC,SA1,SA2,SA3,SA5,激光共聚焦显微镜,观察发现,加生,三维立体结构,基因表达水平,结合力,a
,抗菌药物耐药性,实验室技术和方法
AB值：
0.191219
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