目的 研究蜱媒脑炎病毒(TBEV)在易感细胞中的培养特性,并鉴定病毒RNA的复制、蛋白质表达和感染性.方法 利用非洲绿猴肾细胞Vero培养TBEV,采用qPCR检测TBEV RNA的复制水平,采用蛋白质印迹法检测黄病毒包膜蛋白的表达,采用空斑实验检测培养基中TBEV的滴度.用TBEV感染人肺腺癌细胞A549,于显微镜下观察TBEV感染A549细胞的细胞病变效应.通过免疫荧光法检测TBEV感染的A549、Vero细胞中黄病毒包膜蛋白的表达.结果 与孵育48 h的细胞相比,孵育72 h的Vero细胞内TBEV RNA水平更高,并检测到有黄病毒包膜蛋白表达.空斑实验结果显示,在孵育72 h Vero细胞的培养基中,TBEV病毒滴度为(2.0±1.4)×106空斑形成单位(PFU)/mL.TBEV感染可引起A549细胞的细胞病变效应.在1:1000稀释TBEV感染的细胞中,A549细胞中黄病毒包膜蛋白表达的阳性率(61.0％)高于Vero细胞(9.3％).TBEV感染A549细胞48 h培养基中的病毒滴度高于Vero细胞培养基中的病毒滴度[(2.0±0.4)×107 PFU/mL vs(8.5±2.1)×103 PFU/mL,P<0.05].结论 Vero细胞可用于培养TBEV,A549细胞对TBEV更易感.

蜱媒脑炎病毒;细胞培养;RNA复制;蛋白质表达;滴度

唐万达;赵平;任瑞文;戚中田;赵兰娟

海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室,上海 200433;南部战区疾病预防控制中心,广州 510507

海军军医大学学报

[1]唐万达;赵平;任瑞文;戚中田;赵兰娟-.人肺腺癌细胞A549对蜱媒脑炎病毒的易感性分析)[J].海军军医大学学报,2022(05):478-483

蜱媒脑炎病毒

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