典型文献
家蚕BmChd64基因的克隆与表达定位分析
文献摘要:
Chd64是含有钙结合蛋白同源(Calponin homology,CH)结构域的蛋白,在果蝇蜕皮激素与保幼激素信号通路中发挥重要作用.本研究以家蚕Bombyx mori为研究对象,利用PCR克隆了与果蝇Drosophila melanogaster DmChd64同源的BmChd64基因,与表达载体pET-28a连接后,成功获得体外原核表达的BmChd64蛋白,并对其进行了亚细胞定位分析.家蚕BmChd64基因开放阅读框(ORF)的序列为567 bp,编码188个氨基酸,预测分子量大小为20.9 kDa,理论等电点为8.41,编码的蛋白在第27~130个氨基酸处存在CH结构域.同源性比对与进化分析显示,BmChd64与赤拟谷盗Tribolium castaneum和果蝇的Chd亲缘关系较近.qRT-PCR结果显示,BmChd64在家蚕5龄游走期的不同组织中均有表达,且在翅原基中的表达趋势与家蚕体内蜕皮激素(20-hydroxyecdysone,20E)滴度变化规律一致.亚细胞定位结果显示,BmChd64在细胞核与细胞质中均有分布,细胞核内荧光信号较强,且在细胞核外围较弱,推测细胞质中BmChd64也可入核,最终定位在细胞核中.研究结果表明BmChd64可能主要通过20E信号通路调控翅原基等的变态发育,这为进一步完善20E调控昆虫变态发育的分子机制提供了实验基础.
文献关键词:
家蚕;BmChd64;蜕皮激素;表达分析;亚细胞定位
中图分类号:
作者姓名:
魏秋兰;吴琼芳;邓惠敏;朱子丹
作者机构:
华南师范大学生命科学学院,华南师范大学昆虫科学与技术究所,广东省昆虫发育生物学与应用技术重点实验室,广州510631
文献出处:
引用格式:
[1]魏秋兰;吴琼芳;邓惠敏;朱子丹-.家蚕BmChd64基因的克隆与表达定位分析)[J].环境昆虫学报,2022(04):850-858
A类:
BmChd64,Chd64,DmChd64,Chd
B类:
家蚕,克隆与表达,表达定位,定位分析,钙结合蛋白,Calponin,homology,CH,结构域,果蝇,蜕皮激素,保幼激素,激素信号,Bombyx,mori,Drosophila,melanogaster,表达载体,pET,28a,得体,原核表达,亚细胞定位,开放阅读框,ORF,bp,分子量,kDa,等电点,同源性,进化分析,赤拟谷盗,Tribolium,castaneum,亲缘关系,qRT,游走,不同组织,原基,hydroxyecdysone,20E,滴度,定位结果,细胞核,细胞质,荧光信号,变态发育,昆虫,表达分析
AB值:
0.374549
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