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肝缺血再灌注大鼠外泌体对小胶质细胞焦亡的影响
文献摘要：
目的:评价肝缺血再灌注大鼠外泌体对小胶质细胞焦亡的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠20只，2~3周龄，体重20~50 g，采用随机数字表法分为2组(
n＝10)：假手术组(S组)和肝缺血再灌注组(I/R组)。取S组及I/R组大鼠血清，使用超速离心法提取外泌体。将PKH26标记的外泌体与小胶质细胞共孵育6 h，采用免疫荧光法检测外泌体的摄取。将原代小胶质细胞以5×10
5个/ml的密度接种于6孔板，采用随机数字表法分为4组(
n＝6)：对照组(C组)、10
7个/ml肝缺血再灌注外泌体组(10
7组)、10
8个/ml肝缺血再灌注外泌体组(10
8组)和10
9个/ml肝缺血再灌注外泌体组(10
9组)。依次给予相应浓度肝缺血再灌注外泌体共孵育6 h。采用Western blot法检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved-caspase-1)和消皮素D(GSDMD)的表达。采用随机数字表法将原代小胶质细胞分为3组(
n＝24)：对照组(C组)、假手术外泌体组(S-exosome组)和肝缺血再灌注外泌体组(I/R-exosome组)。S-exosome组和I/R-exosome组分别给予10
8个/ml的S组、I/R组外泌体孵育6 h。采用RT-PCR法检测NLRP3、ASC和GSDMD mRNA的表达，采用ELISA法检测上清液IL-18、IL-1β和TNF-α的浓度。
结果:肝缺血再灌注外泌体与小胶质细胞存在共定位。10
8个/ml和10
9个/ml肝缺血再灌注外泌体上调NLRP3、ASC、GSDMD和cleaved-caspase-1的表达(
P<0.01)。与C组和S-exosome组比较，I/R-exosome组NLRP3、ASC和GSDMD mRNA的表达上调，上清液IL-18、IL-1β和TNF-α的浓度升高(
P<0.01)。
结论:肝缺血再灌注大鼠外泌体可促进小胶质细胞焦亡。
文献关键词：
肝;再灌注损伤;外泌体;小神经胶质细胞;细胞焦亡
中图分类号：
作者姓名：
王一丹;贾莉莉;魏敏;吕景淑;孙英;翁亦齐;喻文立
作者机构：
天津医科大学一中心临床学院，天津 300192;天津市第一中心医院麻醉科，天津 300192
文献出处：
引用格式：
[1]王一丹;贾莉莉;魏敏;吕景淑;孙英;翁亦齐;喻文立-.肝缺血再灌注大鼠外泌体对小胶质细胞焦亡的影响)[J].中华麻醉学杂志,2022(01):60-64
A类：
B类：
肝缺血再灌注,外泌体,细胞焦亡,周龄,假手,大鼠血清,超速离心法,PKH26,孵育,免疫荧光法,摄取,原代小胶质细胞,10
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AB值：
0.144243
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