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嵌合抗原受体T细胞靶向LMP1抗原治疗EB病毒阳性淋巴瘤的功能研究
文献摘要：
目的:制备一种靶向LMP1抗原的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞），研究其对EB病毒（EBV）阳性淋巴瘤的免疫治疗作用。方法:应用分子克隆技术构建二代LMP1 CAR表达质粒，通过慢病毒包装体系包装病毒后感染人T细胞，获得LMP1 CAR-T细胞，体外实验验证LMP1 CAR-T细胞对感染EBV后的LMP1阳性淋巴瘤细胞的特异性细胞毒性作用。结果:①LMP1蛋白表达于EBV阳性的淋巴瘤细胞表面；②成功构建了二代LMP1 CAR慢病毒载体，感染人T细胞，获取LMP1 CAR-T细胞，感染效率大于80%；③LMP1 CAR-T细胞可特异性杀伤LMP1阳性淋巴瘤细胞，当效靶比按4∶1共培养48 h后，LMP1 CAR-T细胞对Raji细胞的杀伤作用增强，对Ramos细胞无明显杀伤作用；④与LMP1阳性淋巴瘤细胞按1∶1共培养5 h后，LMP1 CAR-T细胞处理组CD107a
+ T细胞比例显著高于Vector-T细胞组[（13.25±2.94）%对（1.55±0.05）%，
t＝3.972，
P＝0.017]，脱颗粒效果增强；⑤与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后，LMP1 CAR-T细胞组CD69
+、CD25
+ T细胞比例显高于Vector-T细胞组[（7.40±0.41）%对（3.48±0.47）%，
t＝6.268，
P＝0.003；（73.00±4.73）%对（57.67±2.60）%，
t＝2.842，
P＝0.047]，活化效应增强。⑥与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后，LMP1 CAR-T细胞组细胞因子分泌增强，高于Vector-T细胞组[IFN-γ：（703±73）ng/L对（422±87）ng/L，
t＝2.478，
P＝0.068；TNF-α：（215±35）ng/L对（125±2）ng/L，
t＝2.536，
P＝0.064]。
结论:该研究证实EBV阳性淋巴瘤细胞表面可特异表达LMP1蛋白，成功构建了LMP1 CAR慢病毒载体并感染人T细胞，成功获得LMP1 CAR-T细胞。体外实验证实：与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后，LMP1 CAR-T细胞脱颗粒效果增强，活化效应增强，高效分泌细胞因子，可特异杀伤LMP1阳性淋巴瘤细胞，具有潜在的临床应用前景。
文献关键词：
EB病毒;LMP1抗原;嵌合抗原受体T细胞
中图分类号：
作者姓名：
何慧珍;邢妍妍;张瑜;徐颖茜;田征;邢海燕;唐克晶;饶青;王建祥;王敏
作者机构：
中国医学科学院北京协和医学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所），实验血液学国家重点实验室，国家血液系统疾病临床医学研究中心，天津市血液病细胞治疗研究重点实验室，天津 300020
文献出处：
引用格式：
[1]何慧珍;邢妍妍;张瑜;徐颖茜;田征;邢海燕;唐克晶;饶青;王建祥;王敏-.嵌合抗原受体T细胞靶向LMP1抗原治疗EB病毒阳性淋巴瘤的功能研究)[J].中华血液学杂志,2022(03):229-234
A类：
CD107a
B类：
嵌合抗原受体,细胞靶向,LMP1,病毒阳性,功能研究,CAR,EBV,免疫治疗,治疗作用,分子克隆,克隆技术,技术构建,质粒,过慢,慢病毒包装,装病,体外实验,淋巴瘤细胞,细胞毒性作用,细胞表面,慢病毒载体,特异性杀伤,Raji,杀伤作用,Ramos,Vector,细胞共培养,CD69
,CD25
,活化效应,细胞因子分泌,IFN,特异表达,细胞脱颗粒,临床应用前景
AB值：
0.195724
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