典型文献
脂多糖促进肠道L细胞
miR-425-5p表达的机制研究
文献摘要：
目的:探讨脂多糖（LPS）促进肠道L细胞
miR-425-5p表达的机制。
方法:将肠道L细胞系GLUTag细胞分为对照（NC）组、LPS组（LPS 200 ng/ml培养24 h）、小干扰RNA（siRNA）NC组（LPS 200 ng/ml培养24 h后转染siRNA NC）和NF-κB siRNA组［LPS 200 ng/ml培养24 h后转染核因子-κB（NF-κB）siRNA］，每组3个复孔。采用Western blotting检测细胞核及细胞质中NF-κB p65蛋白表达水平，实时荧光定量聚合酶链反应检测
miR-425-5p表达水平，酶联免疫吸附测定法检测胰高糖素样肽-1（GLP-1）的分泌水平。采用Promo软件分析预测
miR-425-5p启动子上NF-κB的潜在结合位点，双荧光素酶报告实验检测
miR-425-5p启动子区域结合位点的相对活性，染色质免疫沉淀反应验证NF-κB与
miR-425-5p之间的相互作用。两组之间比较采用独立样本
t检验，多组之间比较采用单因素方差分析。
结果:与对照组相比，LPS组的GLP-1分泌水平显著下降（
P<0.01），
miR-425-5p表达水平显著升高（
P<0.01）、细胞质和细胞核中NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（
P<0.05）。与siRNA NC组相比，NF-κB siRNA组细胞核及细胞质中NF-κB p65的蛋白表达水平、
miR-425-5p表达水平均明显下降（
P<0.01）。LPS诱导下，含有两个结合位点（2-Luc/3-Luc）的
miR-425-5p启动子活性明显高于含有单独的结合位点（3-Luc），差异具有统计学意义（
P<0.01）；NF-κB与
miR-425-5p基因启动子序列结合位点2的结合能力最强（
P<0.01）。
结论:LPS通过活化NF-κB，促进其与
miR-425-5p基因启动子序列的结合位点2结合，进而促进肠道L细胞
miR-425-5p转录，最终调节肠道L细胞GLP-1分泌。
文献关键词：
脂多糖类;NF-κB;miR-425-5p;胰高糖素样肽-1
中图分类号：
作者姓名：
韦丽瑞;赵雪楠;陈东东;丁成智;郭丰;刘彦玲;王娇
作者机构：
郑州大学第一附属医院内分泌与代谢病科，郑州 450052;河南省胸科医院胸部肿瘤科，郑州 450008
文献出处：
引用格式：
[1]韦丽瑞;赵雪楠;陈东东;丁成智;郭丰;刘彦玲;王娇-.脂多糖促进肠道L细胞
miR-425-5p表达的机制研究
)[J].中华糖尿病杂志,2022(08):817-822
A类：
GLUTag,Promo
B类：
miR,5p,LPS,细胞系,NC,ml,小干扰,siRNA,转染,核因子,blotting,细胞核,细胞质,p65,蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应,聚合酶链反应检测,酶联免疫吸附测定法,高糖,GLP,泌水,分析预测,结合位点,双荧光素酶报告实验,实验检测,启动子区域,染色质免疫沉淀,沉淀反应,应验,单因素方差分析,两个结合,Luc,启动子活性,基因启动子,启动子序列,结合能,过活,脂多糖类
AB值：
0.21881
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