典型文献
新型光敏蛋白
PsCatCh2.0治疗视网膜退行性疾病的长期有效性和安全性研究
文献摘要：
目的:观察新型光敏蛋白
PsCatCh2.0转染至视网膜色素变性模型rd1小鼠视网膜1年后视网膜神经节细胞（RGC）对光反应、视网膜炎症及细胞凋亡情况。
方法:雄性rd1小鼠24只随机均分为rd1实验组、rd1对照组，各12只。rd1实验组小鼠鼻侧角巩膜缘下1 mm处玻璃体腔注射重组腺相关病毒（rAAV）2/2-巨细胞病毒启动子（CMV）-
PsCatCh2.0-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）1.5 μl，2周后颞侧角巩膜缘下1 mm处再次注射相同剂量的重组病毒。注射后1年，用膜片钳技术记录表达
PsCatCh2.0的RGC对光反应；行免疫荧光染色评估
PsCatCh2.0在视网膜中的表达情况；行视网膜铺片染色评估重组病毒的转染效率，并计数RGC；使用苏木精-伊红染色评估内层视网膜厚度；采用蛋白免疫印迹法检测视网膜中核因子（NF）-κB p65的蛋白表达；采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组小鼠视网膜中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）mRNA相对表达量；采用原位末端标记法观察各组小鼠视网膜细胞凋亡情况。组间比较采用单因素方差分析。
结果:注射重组病毒后1年，表达
PsCatCh2.0的RGC产生的电流约为30 pA。
PsCatCh2.0-EGFP与RGC呈共定位表达；少量与无长突细胞共定位，几乎不与水平细胞、双极细胞共定位。rd1实验组、rd1对照组小鼠RGC密度、内层视网膜厚度比较，差异均无统计学意义（
F=14.35、0.05，
P>0.05）。rd1实验组小鼠视网膜NF-κB p65蛋白表达量以及TNF-α、IL-6 mRNA表达均低于rd1对照组，差异均有统计学意义（
F=4.61、5.91、5.78，
P<0.05）。rd1实验组小鼠视网膜中呈红色荧光的凋亡细胞数量少于rd1对照组，Bax mRNA表达低于rd1对照组，差异有统计学意义（
F=7.52，
P<0.01 ）。
结论:玻璃体腔注射rAAV2/2-CMV-
PsCatCh2.0-EGFP后1年，表达
PsCatCh2.0的RGC仍可产生光电流；长期转染表达
PsCatCh2.0对RGC无明显细胞毒性作用，也不增加视网膜的炎性反应。
文献关键词：
眼疾病，遗传性;视网膜疾病;色素性视网膜炎;视网膜神经节细胞;PsCatCh2.0
中图分类号：
作者姓名：
于垚;陈飞;沈吟
作者机构：
武汉大学人民医院眼科中心, 武汉 430060;武汉大学医学研究院, 武汉 430071
文献出处：
引用格式：
[1]于垚;陈飞;沈吟-.新型光敏蛋白
PsCatCh2.0治疗视网膜退行性疾病的长期有效性和安全性研究
)[J].中华眼底病杂志,2022(07):584-592
A类：
PsCatCh2,rd1
B类：
光敏,视网膜退行性疾病,长期有效性,有效性和安全性,安全性研究,视网膜色素变性,后视,视网膜神经节细胞,RGC,光反应,巩膜,玻璃体腔注射,重组腺相关病毒,巨细胞病毒,启动子,CMV,增强型绿色荧光蛋白,EGFP,重组病毒,膜片钳技术,记录表,免疫荧光染色,转染效率,苏木,木精,伊红,内层,视网膜厚度,蛋白免疫印迹法,核因子,p65,实时荧光定量聚合酶链反应,聚合酶链反应检测,Bax,相对表达量,末端标记,标记法,视网膜细胞,单因素方差分析,pA,共定位,无长突细胞,双极细胞,厚度比,红色荧光,细胞数量,rAAV2,生光,光电流,细胞毒性作用,炎性反应,眼疾病,遗传性,视网膜疾病,色素性视网膜炎,0
AB值：
0.219168
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