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外周血单个核细胞诱导为肝细胞样细胞及初步探讨对乙酰氨基酚作用下的细胞损伤反应
文献摘要：
目的:建立外周血单个核细胞诱导肝细胞样细胞的方法，初步探讨其在对乙酰氨基酚（APAP）作用下的细胞损伤反应。方法:流式细胞术和免疫荧光法检测外周血分离的单个核细胞表面标志CD45；针对诱导的肝细胞样细胞，倒置显微镜观察细胞形态，实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测肝细胞特异性基因细胞色素P450（CYP）1A2、CYP3A4、CYP2C9、白蛋白（ALB）、甲胎蛋白（AFP）、肝细胞核因子（HNF）4α mRNA的表达水平；免疫荧光法检测肝细胞标志物AFP、HNF4α、ALB在细胞中蛋白的表达水平；生化分析仪检测肝细胞特有的AFP、ALB、尿素的分泌功能；荧光素酶化学发光法检测肝细胞关键药物代谢酶CYP3A4酶活性；肝损伤药物APAP作用肝细胞样细胞后，比色测定法检测肝细胞损伤指标丙氨酸转氨酶（ALT）。采用
t检验与秩和检验比较数据间的统计学差异。
结果:外周血分离的单个核细胞表面标志CD45表达阳性率约98%，诱导第15天细胞形态出现肝细胞样变化；与分离的单个核细胞相比，CYP1A2、CYP3A4 、CYP2C9、ALB、AFP、HNF4α mRNA明显升高，AFP、ALB，HNF4α蛋白表达水平均升高，AFP、ALB、尿素的分泌功能增强；与原代肝细胞相比CYP1A2、CYP2C9、AFP、HNF4α mRNA、CYP3A4 mRNA无降低，ALB mRNA较低，AFP、ALB、HNF4α蛋白在细胞中的表达水平无降低，AFP、ALB、尿素的分泌功能无降低。此外肝细胞样细胞产生了与原代肝细胞相似的CYP3A4酶活性;APAP孵育较不含APAP孵育的肝细胞样细胞会释放更多的ALT；在APAP作用下肝细胞样细胞相比分离的单个核细胞ALT释放增加。结论:外周血单个核细胞能诱导为具有肝细胞部分特性的肝细胞样细胞，通过诱导具有了肝细胞关键药物代谢酶CYP3A4活性，肝损伤药物APAP作用下，肝细胞样细胞初步体现了肝细胞损伤时ALT分泌的特征。
文献关键词：
外周血单个核细胞;诱导;肝细胞样细胞;肝细胞损伤
中图分类号：
作者姓名：
刘萍;张彪;曾泉;陈思文;葛晨;王卫华;王昌正;岳文;万军
作者机构：
解放军医学院，北京市 100853;中国人民解放军总医院第二医学中心消化内科 国家老年疾病临床医学研究中心，北京市 100853;军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所军事再生医学研究室，北京市 100850;北京工业大学，北京市 100124
文献出处：
引用格式：
[1]刘萍;张彪;曾泉;陈思文;葛晨;王卫华;王昌正;岳文;万军-.外周血单个核细胞诱导为肝细胞样细胞及初步探讨对乙酰氨基酚作用下的细胞损伤反应)[J].中华肝脏病杂志,2022(01):87-93
A类：
肝细胞特异性基因
B类：
外周血单个核细胞,细胞诱导,肝细胞样细胞,对乙酰氨基酚,APAP,流式细胞术,免疫荧光法,血分,细胞表面,表面标志,CD45,倒置,细胞形态,细胞色素,P450,CYP3A4,CYP2C9,ALB,甲胎蛋白,AFP,细胞核,核因子,HNF4,生化分析仪,分泌功能,荧光素酶,化学发光法检测,药物代谢酶,肝损伤,比色,测定法,肝细胞损伤,损伤指标,丙氨酸转氨酶,ALT,秩和检验,统计学差异,表达阳性,CYP1A2,蛋白表达水平,原代肝细胞,孵育
AB值：
0.171607
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