基于芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)/芳香烃受体核转位因子(AhR nucleart ranslocator,ARNT)/醌氧化还原酶NADH 1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]信号通路探索青嵩琥酯(artesunate,ARS)抗类风湿关节炎骨破坏作用.采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)和核因子-κB受体激活剂(receptor activator of nuclear factor-KB,RANKL)诱导小鼠原代骨髓巨噬细胞向破骨细胞分化的模型,给予ARS(0.2、0.4、0.8 μmol·L-1)干预后,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和F-actin染色来观察破骨细胞的形成和分化,Western blot法检测细胞中AhR和NQO1蛋白表达,免疫荧光定位观察破骨细胞中AhR和ARNT表达分布.同时,建立牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠模型,并给予ARS(7.5、15、30 mg·kg-1)干预,Masson染色观察CIA大鼠软骨和骨破坏情况,免疫组织化学法观察大鼠膝关节组织中AhR、ARNT表达,Western blot法检测膝关节组织中NQO1蛋白表达.结果显示,RANKL诱导组可见大量的TRAP阳性细胞.与RANKL诱导组相比,ARS(0.2、0.4、0.8 μmol·L-1)可以剂量依赖性地抑制TRAP阳性细胞数目;F-actin染色结果显示,随着ARS剂量的升高,对F-actin形成的抑制作用显著增强;Western blot实验和免疫荧光实验进一步发现,ARS干预以后可明显促进AhR表达,且同时向核内转移,进而激活下游ARNT和抗氧化酶NQO1蛋白表达.同时,成功建立CIA大鼠模型,Masson染色实验结果显示,模型组大鼠的关节骨破坏严重,表现为表层软骨失染,胶原纤维排列紊乱,软骨和骨边界不清晰,而阳性药物和ARS不同剂量均对软骨和骨破坏有不同程度的改善作用,尤其是ARS高剂量组作用效果最显著;免疫组织化学法发现ARS不仅促进CIA大鼠膝关节软骨和骨中AhR与ARNT蛋白表达,还可以促进大鼠膝关节组织NQO1蛋白表达.综上,ARS可能通过激活AhR/ARNT/NQO1信号通路,抑制破骨细胞分化从而改善类风湿关节炎.

青蒿琥酯;类风湿关节炎;破骨细胞;骨破坏;AhR/ARNT/NQO1信号通路

汪倩;郭婉怡;刘立玲;陶雪莹;林娜;孔祥英;苏晓慧;韩岚

安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012;中国中医科学院中药研究所,北京100700

中国中药杂志

[1]汪倩;郭婉怡;刘立玲;陶雪莹;林娜;孔祥英;苏晓慧;韩岚-.基于AhR/ARNT/NQO1信号通路探索青蒿琥酯对类风湿关节炎骨破坏的抑制作用)[J].中国中药杂志,2022(10):2698-2704

nucleart,ranslocator

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