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典型文献
寨卡病毒感染人肝癌细胞HepG2后外泌体中差异miRNA分析
文献摘要:
目的:探索人肝癌细胞HepG2感染寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)后的外泌体miRNA的表达差异,对其靶基因进行预测、分析。方法:以感染复数0.5的ZIKV(ZJ03株)感染HepG2,以超速离心法提取、纯化感染2 d与未感染细胞的外泌体(Exo-ZIKV与Exo-NC)。以透射电镜观察外泌体形态,纳米粒径分析检测外泌体粒径分布,Western blot检测外泌体标志蛋白质等方法鉴定。提取纯化外泌体小RNA,进行miRNA测序与分析,对部分差异表达miRNA采用实时定量PCR验证。生物信息方法分析差异miRNA靶基因。结果:在透射电镜下呈杯托状双层膜小囊泡结构;粒径大小分布几乎一致但Exo-ZIKV浓度(5.24×10 8颗粒/ml )较Exo-NC(3.06×10 8 paritcle/ml)增多。Western blot检测出Hsp70、CD63和CD9蛋白表达,测序分析显示共20个差异表达miRNA,其中12个miRNA表达上调8个miRNA表达下调,上调miRNA多与抗病毒通路相关,差异表达miRNA对应的靶基因主要富集在嘧啶与嘌呤代谢等途径中。 结论:ZIKV感染能刺激HepG2细胞外泌体分泌增加,且引起外泌体miRNA表达变化,这为深入了解ZIKV感染导致肝细胞损伤机制提供新基础,为ZIKV治疗提供新的思路。
文献关键词:
寨卡病毒;HepG2细胞;外泌体;外泌体miRNA;蚊媒传染病
作者姓名:
周婉葵;宫悦;顾金保;王衍海
作者机构:
广东省佛山市南海经济开发区人民医院检验科,佛山 528000;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京 102206;南方医科大学公共卫生学院,广州 510515
引用格式:
[1]周婉葵;宫悦;顾金保;王衍海-.寨卡病毒感染人肝癌细胞HepG2后外泌体中差异miRNA分析)[J].中华实验和临床病毒学杂志,2022(06):659-665
A类:
ZJ03,paritcle
B类:
寨卡病毒,人肝癌细胞,HepG2,miRNA,Zika,virus,ZIKV,表达差异,靶基因,复数,超速离心法,化感,未感染,Exo,NC,透射电镜,电镜观察,纳米粒,粒径分析,分析检测,粒径分布,blot,提取纯化,化外,差异表达,实时定量,信息方法,双层膜,小囊,囊泡,粒径大小,10 ,ml,Hsp70,CD63,CD9,测序分析,抗病毒,嘧啶,嘌呤代谢,细胞外泌体,表达变化,肝细胞损伤,损伤机制,蚊媒传染病
AB值:
0.326999
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