典型文献
梨幼果FWL1膜系统酵母双杂交三框cDNA文库构建及互作蛋白的筛选
文献摘要:
[目的]筛选与FWL1互作的蛋白,为研究FWL1基因调节果实大小机理提供依据.[方法]以杜梨、库尔勒香梨、鸭梨、早美香为材料,提取4个梨品种果实细胞分裂关键时期的果肉组织混样RNA.构建梨幼果FWL1膜系统酵母双杂交三框cDNA文库,并鉴定文库质量.构建诱饵载体并转化酵母菌,筛选与FWL1互作的蛋白,对初步筛选出的阳性酵母克隆进行测序并在NCBI中进行Blast比对,确定候选互作蛋白.[结果]文库库容约为3×107 CFU,大于1×107 CFU,平均插入片段大于1000 bp,阳性率为≥98%.诱饵载体无自激活功能,利用共转化方法,筛选出272个与FWL1互作的蛋白质.[结论]梨幼果膜系统酵母双杂交三框cDNA文库符合酵母双杂文库的基本条件,适用于后期筛选相互作用的蛋白.筛选出的272个互作蛋白在果实发育过程中表达不同,其中collagen and calcium-binding EGF domain-containing protein 1和metallothionein-like protein可能与梨果实大小发育有关.
文献关键词:
梨;果实大小;fw2.2;三框cDNA文库;互作蛋白筛选
中图分类号:
作者姓名:
赛静忆;温玥;郝志超;田嘉
作者机构:
新疆农业大学园艺学院,乌鲁木齐 830052
文献出处:
引用格式:
[1]赛静忆;温玥;郝志超;田嘉-.梨幼果FWL1膜系统酵母双杂交三框cDNA文库构建及互作蛋白的筛选)[J].新疆农业科学,2022(08):1877-1888
A类:
FWL1,fw2
B类:
幼果,膜系统,酵母双杂交,cDNA,文库构建,果实大小,杜梨,库尔勒香梨,鸭梨,梨品种,种果,细胞分裂,果肉,诱饵载体,酵母菌,初步筛选,NCBI,Blast,库容,CFU,bp,自激,共转化,转化方法,杂文,基本条件,选相,果实发育,collagen,calcium,binding,EGF,domain,containing,protein,metallothionein,like,梨果实,互作蛋白筛选
AB值:
0.32755
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