典型文献
组织血型抗原Ley低表达的人巨核细胞系的建立和鉴定
文献摘要：
目的 应用CRISPR/cas9技术,建立血小板Ley抗原差异化表达的人白血病巨核细胞系,为后续研究Ley抗原在血小板活化中的作用奠定基础.方法 选取人巨核细胞白血病细胞DAMI,用Western Blot及流式细胞法确定Ley抗原的表达量;用实时定量PCR方法检测编码Ley抗原合成相关的岩藻糖基转移酶(fucosyltransferase,FUT)基因的表达,确定候选敲除基因,用CRISPR/Cas9敲除候选FUT基因,使用流式细胞仪分选出Ley抗原低表达的细胞群,培养细胞并鉴定Ley抗原的表达量.用活细胞染色结合流式细胞法监测细胞增殖.结果 DAMI细胞上具有大量的Ley抗原表达;FUT1和FUT4在DAMI中有相对较高的mRNA表达,可能对Ley抗原的表达起关键作用;敲除FUT1后的DAMI细胞系Ley抗原的表达量与对照相比有显著降低,细胞增殖能力与野生型细胞相比没有显著改变.结论 Ley抗原的生物合成涉及多种FUT基因,对其中主要的FUT进行基因敲除无法彻底阻断Ley抗原的合成,只能降低Ley抗原的表达,本研究应用CRISPR/cas9技术敲除FUT基因建立的稳转人白血病巨核细胞系,为研究Ley抗原对血小板功能的影响和意义奠定了基础.
文献关键词：
组织血型抗原;血小板功能;人巨核细胞;岩藻糖基转移酶;基因敲除
中图分类号：
作者姓名：
朱慧君;马勤勤;赵俸涌;李勤;陆萍
作者机构：
上海市血液中心,上海200051
文献出处：
引用格式：
[1]朱慧君;马勤勤;赵俸涌;李勤;陆萍-.组织血型抗原Ley低表达的人巨核细胞系的建立和鉴定)[J].中国输血杂志,2022(09):891-895
A类：
Ley,人巨核细胞,DAMI,FUT,FUT4
B类：
组织血型抗原,低表达,细胞系,CRISPR,cas9,差异化表达,白血病,血小板活化,Blot,流式细胞法,实时定量,岩藻糖基转移酶,fucosyltransferase,Cas9,流式细胞仪,分选,用活,活细胞,细胞染色,色结,合流,FUT1,细胞增殖能力,野生型,生物合成,基因敲除,研究应用,血小板功能,影响和意义
AB值：
0.174637
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
