典型文献
利用D--外周血B细胞构建单克隆抗-C杂交瘤细胞株
文献摘要：
目的 以1例稀有的O型D--献血者外周血单个核细胞为实验对象,制备分泌Rh血型系统单克隆抗体的杂交瘤细胞株.方法 无菌分离外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞(PBMCs),利用B95-8培养上清中的EB病毒(EBV),转化PBMCs中的B淋巴细胞使其母细胞化.血清学筛选分泌特异性抗体的单一 B细胞克隆并扩大培养,与SHM-D33瘤细胞在电刺激下融合,经含有次黄嘌呤(Hypoxantine,H)、氨基蝶呤(Aminopterin,A)、胸腺嘧啶核苷(Thymidine,T)、脱氧胞嘧啶核苷(2-Deoxycytide,D)、毒毛旋花苷(Ouabain,O)的培养基,即HOTD(HATD+Ouabain)选择性培养、微量板抗体筛选以及有限稀释亚克隆,建立分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,血清学和流式细胞试验鉴定抗体特异性.结果 从D--外周血转化B淋巴细胞培养上清中,初筛得到与R1R1(DCe/DCe)O型红细胞凝集,与R2R2(DcE/DcE)O型红细胞不凝集的单个细胞克隆3A6-C6,初步鉴定抗体特异性为抗-C,与SHM-D33骨髓瘤细胞杂交后建立了持续稳定分泌IgM抗-C的杂交瘤细胞株.结论 本研究从外周血B细胞开始构建单克隆杂交瘤细胞株,为Rh血型系统血清学单克隆试剂的研发和改造奠定了基础.
文献关键词：
D--表型;人单克隆抗体;抗-C;杂交瘤技术
中图分类号：
作者姓名：
郭忠慧;赵俸涌;张德梅;向东;张嘉敏;杨颖;李勤;杨启修;王晨;朱自严
作者机构：
上海市血液中心,上海200051;太原市血液中心
文献出处：
引用格式：
[1]郭忠慧;赵俸涌;张德梅;向东;张嘉敏;杨颖;李勤;杨启修;王晨;朱自严-.利用D--外周血B细胞构建单克隆抗-C杂交瘤细胞株)[J].中国输血杂志,2022(04):400-404
A类：
Hypoxantine,氨基蝶呤,Aminopterin,Deoxycytide,Ouabain,HOTD,HATD+Ouabain,R1R1,DCe,R2R2,DcE,3A6
B类：
杂交瘤细胞株,稀有,献血者,外周血单个核细胞,实验对象,Rh,血型系统,无菌,外周血白细胞,细胞分离,PBMCs,B95,养上,上清,EBV,母细胞,血清学,特异性抗体,细胞克隆,扩大培养,SHM,D33,电刺激,次黄嘌呤,胸腺嘧啶核苷,Thymidine,脱氧,胞嘧啶,抗体筛选,有限稀释,亚克,试验鉴定,抗体特异性,细胞培养,初筛,红细胞凝集,C6,骨髓瘤细胞,持续稳定,IgM,人单克隆抗体,杂交瘤技术
AB值：
0.263975
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