目的 探讨Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 采用CRISPR/Cas9技术构建质粒并敲除SW480细胞的Tspan8基因,Western blot法检测敲除效果.采用MTT法计算安罗替尼的半数抑制浓度(IC50).实验分为对照组、安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组.采用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;Western blot法检测安罗替尼对SW480细胞中Tspan8表达水平的影响.结果 在Tspan8敲除组中,SW480-KO-Ⅲ细胞的敲除效率最高,用于后续实验.不同浓度的安罗替尼在不同作用时间均能抑制SW480细胞的增殖(P＜0.01),且呈浓度依赖性和时间依赖性(P＜0.01),根据IC50选择14 pmol/L为后续实验浓度.与对照组相比,安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组的细胞增殖、迁移及侵袭能力显著降低,细胞凋亡水平明显提高(P＜0.05),且联合组的上述变化较安罗替尼组或Tspan8敲除组更为显著(P＜0.05).与对照组相比,安罗替尼组SW480细胞的Tspan8表达水平明显下降(P＜0.01).结论 Tspan8基因敲除联合安罗替尼能协同抑制SW480细胞增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡.

结肠癌;安罗替尼;Tspan8;细胞增殖;细胞侵袭

谢转红;许云鹏;马珲敏;王祥

730000兰州,兰州大学第二临床医学院;730000兰州,兰州大学第二医院消化内科

肿瘤防治研究

[1]谢转红;许云鹏;马珲敏;王祥-.Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响)[J].肿瘤防治研究,2022(10):1028-1036

Tspan8

基因敲除,安罗替尼,结肠癌,SW480,CRISPR,Cas9,技术构建,质粒,blot,MTT,半数抑制浓度,IC50,克隆形成,划痕实验,Transwell,小室,流式细胞术,细胞的增殖,KO,除效率,作用时间,浓度依赖性,时间依赖性,pmol,迁移及侵袭,侵袭能力,协同抑制,细胞侵袭

0.202089