目的 探讨抑制miR-182-5p对草酸钙结晶性肾损伤的影响及其可能的作用机制.方法 将72只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、阴性对照(NC)抑制剂组、miR-182-5p抑制组、miR-182-5p抑制+NC沉默组、miR-182-5p抑制+脂肪酸结合蛋白4(FABP4)沉默组,每组12只.除对照组外,其他组均构建肾草酸钙结晶小鼠模型,建模成功后,NC抑制剂组、miR-182-5p抑制组、miR-182-5p抑制+NC沉默组、miR-182-5p抑制+FABP4沉默组分别通过尾静脉注射 NC antagomir、miR-182-5p antagomir、miR-182-5p antagomir 和 NC shRNA、miR-182-5p antagomir 和 FABP4 shRNA,对照组、模型组通过尾静脉注射等量的生理盐水.检测尿离子钙、血清肌酐(Scr)及血尿素氮(BUN)浓度及尿草酸浓度;HE染色、pizzolato染色分别检测小鼠肾组织病理变化、草酸钙结晶沉积;分析小鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肾小管上皮细胞凋亡情况;qRT-PCR、Western blot分别检测肾组织中miR-182-5p、FABP4蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5p与FABP4的关系.结果 与对照组比较,模型组和NC抑制剂组小鼠病理评分,尿离子钙、尿草酸、Scr、BUN、MDA水平、草酸钙结晶沉积、肾小管上皮细胞凋亡率及miR-182-5p表达显著升高,SOD水平及FABP4蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与模型组、NC抑制剂组比较,miR-182-5p抑制组、miR-182-5p抑制+NC沉默组小鼠病理评分、尿离子钙、尿草酸、Scr、BUN、MDA水平、草酸钙结晶沉积、肾小管上皮细胞凋亡率及miR-182-5p表达显著降低,SOD水平及FABP4蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与miR-182-5p 抑制组、miR-182-5p抑制+NC沉默组比较,miR-182-5p抑制+FABP4沉默组小鼠肾组织病理评分、尿离子钙、尿草酸、Scr、BUN、MDA水平、草酸钙结晶沉积、肾小管上皮细胞凋亡率显著升高,SOD水平及FABP4蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验结果显示,与mimic NC和WT-FABP4共转染组比较,miR-182-5p mimic和WT-FABP4共转染组HEK293T细胞的荧光素酶活性显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抑制miR-182-5p通过上调FABP4抑制氧化应激,降低肾小管细胞凋亡,进而发挥对小鼠草酸钙结晶性肾损伤的保护作用.

miR-182-5p;草酸钙;肾损伤;氧化应激;脂肪酸结合蛋白4

崔增林;刘高瑞;臧海洋;姜言梦

新乡医学院第三附属医院泌尿外科,河南新乡453003

热带医学杂志

[1]崔增林;刘高瑞;臧海洋;姜言梦-.miR-182-5p调控FABP4表达对草酸钙结晶性肾损伤的影响)[J].热带医学杂志,2022(06):756-762,封4

+FABP4,pizzolato

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