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膜联蛋白A1对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响
文献摘要:
目的:通过短发夹RNA(shRNA)干扰膜联蛋白A1(AnnexinA1,ANXA1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞系中的表达,探讨ANXA1对PTC细胞的生物行为学影响。方法:设计使用具有专一高效性的shRNA在TPC-1和BCPAP细胞系中特异性干扰ANXA1的表达,分别对TPC-1及BCPAP细胞系进行转染,包括特异性ANXA1干扰及阴性对照病毒转染,分为shANXA1组和阴性对照病毒组,然后通过半定量逆转录PCR(Q-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western Blot)验证基因表达,以shANXA1组为实验组,未转染病毒组及阴性对照病毒组为对照组,比较三组细胞ANXA1的表达水平,验证shRNA干扰效率,再通过划痕、CCK8、Transwell侵袭实验探究ANXA1敲减后对TPC-1和BCPAP细胞系增殖、迁移及侵袭能力的影响。使用独立样本
t检验比较两组间均数,多组间比较采用单因素方差分析,
P<0.05差异具有统计学意义。
结果:shRNA可高效沉默ANXA1在PTC细胞系中转录和翻译水平上的表达,通过慢病毒转染成功后的TPC-1和BCPAP和阴性对照组细胞相比,细胞增殖(BCPAP,24 h:
F=25.15,
P<0.001;48 h:
F=6.44,
P<0.001;48 h:
F=46.94,
P<0.001;TPC-1,24 h:
F=207.50,
P<0.001;48 h:
F=202.45,
P<0.001;48 h:
F=55.89,
P<0.001),迁移(BCPAP,
F=12511.10,
P<0.001;TPC-1,
F=3966.10,
P<0.001)及侵袭能力(BCPAP:
F=94.65,
P<0.001;TPC-1:
F=681.74,
P<0.001)明显下降。
结论:shRNA敲减ANXA1基因后,TPC-1及BCPAP细胞系增殖、迁移及侵袭能力显著下降,表明沉默该基因可降低肿瘤的侵袭性,并初步揭示ANXA1可能是PTC生物治疗中一个重要的潜在靶点。
文献关键词:
短发夹RNA;膜联蛋白;甲状腺乳头状癌;细胞功能实验
中图分类号:
作者姓名:
陈立;田志刚;贾兰宁;杨洋;赵科;王义增;何向辉
作者机构:
天津医科大学总医院普通外科,天津 300052;天津市普通外科研究所,天津 300052;天津市人民医院,天津 300191
文献出处:
引用格式:
[1]陈立;田志刚;贾兰宁;杨洋;赵科;王义增;何向辉-.膜联蛋白A1对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响)[J].中华内分泌外科杂志,2022(01):23-27
A类:
AnnexinA1,shANXA1
B类:
膜联蛋白,甲状腺乳头状癌,癌细胞,迁移及侵袭,侵袭能力,短发,发夹,shRNA,papillary,thyroid,carcinoma,PTC,细胞系,生物行为,行为学,设计使用,专一,TPC,BCPAP,病毒组,过半,半定量,逆转录,蛋白免疫印迹法,Blot,划痕,CCK8,Transwell,实验探究,敲减,均数,单因素方差分析,翻译水平,过慢,慢病毒转染,染成,侵袭性,生物治疗,潜在靶点,细胞功能实验
AB值:
0.232943
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