典型文献
肝癌细胞仑伐替尼耐药的基因筛选及其通路研究
文献摘要：
目的 基于CRISPR/Cas9技术筛选肝癌仑伐替尼耐药相关基因并探究其潜在关系.方法 应用CRISPR/Cas9 sgRNA全基因组文库技术结合Affymetrix表达谱芯片筛选肝癌对仑伐替尼耐药的相关基因.通过TCGA数据库分析这些基因在肝癌中的表达及预后的关系,最终确定采用THOC2为肝癌仑伐替尼耐药基因并用于后续研究.采用免疫组织化学(immunohistochemical,IHC)染色、Western blotting、RT-PCR检测THOC2在肝癌细胞株(MHCC-97H、MHCC-LM3、SMMC-7721)及仑伐替尼耐药/敏感肝癌组织中的表达情况.通过慢病毒感染构建高表达THOC2的SMMC-7721-THOC2肝癌细胞,采用免疫共沉淀(Co-IP)等技术探讨THOC2介导肝癌仑伐替尼耐药的可能机制.结果 发现7个与肝癌仑伐替尼抵抗密切相关的耐药基因,包括THOC2、CTNNB1(β-catenin)、MET(c-Met/HGFR)、HTATIP2、C10orf11、PRDX3、MAST4.TCGA分析提示THOC2在肝癌与癌旁中表达存在统计学差异,且与肝癌临床分期及预后密切相关.IHC染色、Western blotting、RT-PCR检测发现THOC2主要分布于胞核中,其在仑伐替尼耐药组患者中的表达水平高于药物敏感组患者;THOC2在高转移潜能的肝癌细胞株(MHCC-97H、MHCC-LM3)中的表达较在SMMC-7721中更显著;Western blotting、Co-IP进一步表明上调THOC2后Wnt/β-catenin通路下游靶点BAX、cyclinD1和c-myc蛋白水平显著增高,且THOC2与β-catenin存在相互作用关系.结论 THOC2基因高表达可能通过Wnt/β-catenin通路参与调控肝癌对仑伐替尼的耐药.
文献关键词：
THOC2基因;仑伐替尼;肝细胞癌;CRISPR/Cas9;靶向耐药
中图分类号：
作者姓名：
陈家诚;刘路政;陈良;陈骋;许达峰;林仕勋;罗相相;武金才
作者机构：
海南省人民医院/海南医学院附属海南医院 肝胆胰外科,海南 海口 570311
文献出处：
引用格式：
[1]陈家诚;刘路政;陈良;陈骋;许达峰;林仕勋;罗相相;武金才-.肝癌细胞仑伐替尼耐药的基因筛选及其通路研究)[J].肝胆胰外科杂志,2022(03):157-163
A类：
THOC2,HGFR,HTATIP2,C10orf11,PRDX3,MAST4
B类：
仑伐替尼,基因筛选,CRISPR,Cas9,技术筛选,潜在关系,sgRNA,全基因组,文库,技术结合,Affymetrix,表达谱芯片,TCGA,数据库分析,耐药基因,免疫组织化学,immunohistochemical,IHC,blotting,肝癌细胞株,MHCC,97H,LM3,SMMC,肝癌组织,过慢,慢病毒感染,免疫共沉淀,Co,技术探讨,可能机制,CTNNB1,catenin,MET,Met,癌旁,统计学差异,临床分期,药组,药物敏感,Wnt,路下,BAX,cyclinD1,myc,相互作用关系,肝细胞癌,靶向耐药
AB值：
0.272377
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