目的 探讨胃癌组织中微小RNA(microRNA)-3148的表达及其影响胃癌NCI-N87细胞增殖、迁移的作用机制.方法 收集2018年2月至2021年9月在空军第986医院普通外科行肿瘤切除的42例胃癌患者的癌组织和癌旁组织标本.用qRT-PCR检测胃癌组织及胃癌细胞株(BGC823、HS-746T、NCI-N87、SGC7901)中miR-3148的表达水平.分别用miR-3148模拟物(miR-3148组)和阴性对照模拟物(miR-NC组)转染NCI-N87细胞,qRT-PCR分别检测两组NCI-N87细胞中miR-3148的表达水平,CCK8法和细胞划痕愈合实验分别检测miR-3148对NCI-N87细胞增殖和迁移能力的调控作用.生物信息学工具miRGator预测miR-3148的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3148与靶基因的结合作用.qRT-PCR和Western blot分别检测两组NCI-N87细胞中miR-3148靶基因及Akt/mTOR信号通路蛋白p-Akt、p-mTOR、p-4EBP1的表达.结果 胃癌组织中miR-3148表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01),胃癌细胞株(BGC823、HS-746T、NCI-N87、SGC7901)中miR-3148表达水平显著低于正常胃黏膜上皮细胞(均P<0.05).miR-NC组和miR-3148组中miR-3148相对表达分别为0.18±0.04和1.02±0.16,miR-3148组NCI-N87细胞中miR-3148表达明显增加(P<0.01).与miR-NC组相比,miR-3148组NCI-N87细胞增殖能力显著降低(P<0.05).miR-NC组和miR-3148组迁移指数分别为(75.59±5.98)％和(29.96±8.62)％,与miR-NC组相比,miR-3148组NCI-N87细胞迁移指数显著降低(P<0.01).miRGator工具预测并经双荧光素酶报告基因实验验证核糖核苷酸还原酶M2(ribonucleotide reductase M2,RRM2)是miR-3148的靶基因.miR-NC组和miR-3148组细胞中RRM2 mRNA的表达分别为5.83±0.90和1.05±0.40,与miR-NC组相比,miR-3148组RRM2基因表达显著降低(P<0.01).与miR-NC组相比,miR-3148组Akt/mTOR信号通路蛋白p-Akt、p-mTOR、p-4EBP1表达降低.结论 miR-3148在胃癌组织和细胞株中呈现低表达,miR-3148通过下调RRM2基因表达影响Akt/mTOR信号通路活性,抑制胃癌NCI-N87细胞的增殖与迁移.

胃癌;miR-3148;细胞增殖;细胞迁移;核糖核苷酸还原酶M2

闫曦;武李红;边号;张伟杰

空军第986医院消化内科,西安 710054;南京大学医学院附属金陵医院消化内科

山西医科大学学报

[1]闫曦;武李红;边号;张伟杰-.miR-3148通过影响RRM2表达抑制胃癌NCI-N87细胞的增殖与迁移)[J].山西医科大学学报,2022(04):390-395

miRGator

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