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典型文献
两株CRISPR工程大肠埃希菌在小鼠体内的定植实验研究
文献摘要:
目的 利用小鼠对2株大肠埃希菌工程菌Nissle1917和BW25113在肠道的定植能力与定植效率进行评价,以筛选出肠道定植效率高的菌株,为后续利用成簇的规律性间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspersed short palindromic repeats,CRISPR)及其相关蛋白(CRISPR associated protein,Cas)系统的工程菌消减体内耐药菌的研究奠定基础.方法 每株工程菌的实验共取70只18~20 g的ICR小鼠,雌雄各半,操作时小鼠区分性别并随机分为7个处理组,每组10只(6只实验,4只对照).实验组灌胃2×1010个工程菌共200μL,对照组灌胃等体积的PBS.灌胃后1、3、6、12、24、48、72 h分别取小鼠的肠系膜淋巴结、胃、回盲部、结肠组织及内容物,分别采用平板划线、荧光镜检和PCR法检测工程菌,比较Nissle1917和BW25113这2菌株在小鼠体内的定植能力与效率.结果 灌胃后前6个时段(1、3、6、12、24、48 h)中,3种方法检测到2株菌在胃、回盲部、结肠组织有定植,淋巴结未检到目标菌株;而72 h有且仅有Nissle1917菌定植于回盲部和结肠组织,Nissle1917和BW25113两株菌的定植效率分别为100%和0.结论 Nissle1917菌定植效率高于BW25113菌,且能较长时间定植于回盲部和结肠组织,提示其可作为防控耐药基因传播用CRISPR系统的备选载体菌.
文献关键词:
CRISPR工程大肠埃希菌;肠道定植能力;定植效率;ICR小鼠
作者姓名:
任晨吟;高思琦;李浩;唐标;杨华;刘月环
作者机构:
杭州医学院临床医学院,杭州310053;杭州医学院护理学院,杭州310053;浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所,杭州310021;杭州医学院浙江省实验动物与安全性研究重点实验室,杭州310013
引用格式:
[1]任晨吟;高思琦;李浩;唐标;杨华;刘月环-.两株CRISPR工程大肠埃希菌在小鼠体内的定植实验研究)[J].实验动物与比较医学,2022(06):541-550
A类:
Nissle1917,定植效率,肠道定植能力
B类:
两株,CRISPR,大肠埃希菌,工程菌,BW25113,后续利用,回文,重复序列,clustered,regularly,interspersed,short,palindromic,repeats,associated,protein,Cas,消减,耐药菌,每株,共取,ICR,雌雄,各半,区分性,灌胃,PBS,肠系膜,淋巴结,回盲部,结肠组织,内容物,划线,光镜,未检,目标菌,较长时间,耐药基因,备选,选载
AB值:
0.317761
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