目的 通过观察microRNA-9对其下游靶点P2X7受体、炎性因子、血管紧张素Ⅱ的影响,分析电针降压机制.方法 选择原发性高血压模型大鼠(spontaneous hypertension rat,SHR)作为高血压动物模型,将SHR随机分为4组:假手术组、miR9抑制剂+电针组、电针组、模型组,Wistar大鼠作为空白组(共5组,每组10只).其中,miR9抑制剂+电针组在SHR室旁核内行双极插管植入术后注射microRNA-9抑制剂(每单侧100 nL/天),假手术组、电针组注射等剂量脑脊液.术后5天进行电针干预,穴取双侧太冲、曲池.在电针前和电针后3、7、10、14天测量收缩压,连续电针治疗2周后取材,通过实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)对各组大鼠下丘脑microRNA-9的表达进行定量检测,利用qPCR和蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测各组大鼠P2X7受体的mRNA和蛋白水平,使用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,Elisa)检测下丘脑室旁核和血浆中炎性因子白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和血管紧张素II(angiotensinⅡ,ANGⅡ)的含量.最后使用抗体Iba1进行免疫组化染色,评估下丘脑室旁核内小胶质细胞的活化程度.结果 (1)与假手术组相比,电针组降低了高血压大鼠的收缩压(P<0.01),与电针组相比,miRNA9抑制剂+电针组的降压效果下降(P<0.05);(2)电针组与miRNA9抑制剂+电针组、假手术组相比,miRNA9水平明显升高(P<0.01);(3)与miRNA9抑制剂+电针组相比,电针组室旁核、血清中的IL-6含量更低(P<0.01,P<0.01),与miRNA9抑制剂+电针组相比,电针组室旁核、血清中的TNF-α 含量更低(P<0.05,P<0.05);(4)与假手术组相比,电针组的ANGII含量下降明显(P<0.01),但电针组与miR-9抑制剂+电针组ANGII的含量相比无统计学差异(P>0.05);(5)与假手术组相比,电针组降低了P2X7受体的蛋白及mRNA表达(P<0.01,P<0.01),与电针组相比,miRNA9抑制剂+电针组中P2X7受体的蛋白及mRNA表达明显较高(P<0.01,P<0.01);(6)免疫组化染色结果显示,电针组与miRNA9抑制剂+电针组、假手术组相比,室旁核小胶质细胞激活程度明显降低(P<0.01,P<0.01).结论 电针干预后影响了SHR下丘脑室旁核内miRNA-9的表达,并可能通过抑制P2X7受体的表达、炎症因子IL-6、TNF-α的释放、小胶质细胞的激活,从而降低血压.

微核糖核酸;P2X7受体;电针;原发性高血压

岳炳南;孙娇;李晓璐;周子娴;刘鑫;刘清国

100029 北京中医药大学针灸推拿学院

环球中医药

[1]岳炳南;孙娇;李晓璐;周子娴;刘鑫;刘清国-.电针原发性高血压模型大鼠太冲、曲池穴观察microRNA-9对其下游靶点P2X7受体、炎性因子、血管紧张素II的影响)[J].环球中医药,2022(12):2342-2349

miR9,miRNA9,ANGII

原发性高血压,压模,模型大鼠,太冲,曲池,microRNA,P2X7,炎性因子,血管紧张素,通过观察,压机,spontaneous,hypertension,rat,SHR,动物模型,假手,Wistar,内行,双极,插管,植入术,nL,脑脊液,电针干预,收缩压,电针治疗,取材,实时荧光定量多聚核苷酸链式反应,real,quantitative,polymerase,chain,reaction,qPCR,定量检测,蛋白免疫印迹法,western,blot,WB,酶联免疫吸附法,enzyme,linked,immunosorbent,assay,Elisa,下丘脑室旁核,白介素,interleukin,tumor,necrosis,angiotensin,Iba1,免疫组化染色,小胶质细胞,高血压大鼠,降压效果,统计学差异,白及,染色结果,胶质细胞激活,预后影响,低血压,微核糖核酸

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