典型文献
过表达Ctnnb1慢病毒及其稳转大鼠间充质干细胞株的构建
文献摘要:
目的 构建过表达大鼠Ctnnbl (catenin beta 1)慢病毒载体,建立过表达Ctnnb1的大鼠间充质干细胞(MSC)稳转株,为后续研究过表达Ctnnb1的MSC产生的外泌体对老年慢性阻塞性肺疾病相关肺动脉高压(COPD-PH)的作用和机制奠定基础.方法 PCR扩增Ctnnb1基因全序列,将序列插入PGMLV-18844:PGMLV-CMV-MCS-3×Flag-PGK-Puro载体,构建PGMLV-CMV-Rat_Ctnnb1-3×Flag-PGK-Puro慢病毒表达质粒,质粒瞬转293细胞后,使用Western Blot验证其过表达效率.再将构建的慢病毒载体和包装质粒共转染293细胞,包装病毒.包装的过表达慢病毒和阴性对照病毒感染大鼠MSC,再次使用Western Blot测定其过表达效果.结果 经测序分析,本研究成功构建了PGMLV-CMV-Rat Ctnnb1-3×Flag-PGK-Puro慢病毒载体.Western Blot结果提示,该慢病毒载体成功转染293细胞,构建的载体能高效过表达Ctnnb1;过表达Ctnnb1的慢病毒感染大鼠MSC后,得到过表达Ctnnb1基因的大鼠MSC稳转株.结论 本研究成功构建过表达Ctnnb1慢病毒及其稳转大鼠MSC株.
文献关键词:
老年;慢性阻塞性肺疾病相关肺动脉高压;β-连环蛋白;慢病毒载体;间充质干细胞
中图分类号:
作者姓名:
徐康乔;韦雅芹;周长喜;夏世金
作者机构:
复旦大学附属华东医院上海市老年医学研究所,上海200040;解放军总医院第二医学中心老年医学科,北京100853
文献出处:
引用格式:
[1]徐康乔;韦雅芹;周长喜;夏世金-.过表达Ctnnb1慢病毒及其稳转大鼠间充质干细胞株的构建)[J].老年医学与保健,2022(01):69-74
A类:
Ctnnbl,PGMLV
B类:
过表达,Ctnnb1,间充质干细胞,细胞株,catenin,beta,慢病毒载体,MSC,外泌体,老年慢性阻塞性肺疾病,慢性阻塞性肺疾病相关肺动脉高压,COPD,PH,全序,CMV,MCS,Flag,PGK,Puro,Rat,质粒,Blot,表达效率,共转染,装病,表达效果,测序分析,慢病毒感染,连环蛋白
AB值:
0.20044
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