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补骨脂素对炎性环境下人牙周膜干细胞成骨分化的影响及机制
文献摘要:
目的 探究补骨脂素对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨分化作用及可能机制.方法 利用酶消化法和有限稀释法体外分离并纯化hPDLSCs,流式细胞术鉴定细胞表型,成骨及成脂诱导检测细胞多向分化能力;取第3代hPDLSCs并分为对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导组(10 ng/mL)、补骨脂素低(TNF-α10 ng/mL+补骨脂素2μmol/L)、中(TNF-α10 ng/mL+补骨脂素6μmol/L)、高(TNF-α10 ng/mL+补骨脂素18μmol/L)剂量组,各组均利用成骨诱导培养液培养.7 d后,碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测ALP活性;RT-qPCR技术检测Runt相关转录因子2(Runx2)、锌指结构转录因子(Osx)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)mRNA相对表达水平;Western blot技术检测Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)、组织蛋白酶K(CTSK)蛋白相对表达水平;21 d后,茜素红染色及比色分析法检测钙沉积情况.结果 经细胞表型及分化能力鉴定,确定分离培养的细胞为hPDLSCs;经成骨化及炎性环境诱导后,与对照组比较,TNF-α诱导组、补骨脂素3个治疗组中ALP活性、矿化钙沉积吸光度值、Runx2、Osx、OPN及OCN mRNA相对表达水平、Wnt3a、β-catenin及p-GSK-3β蛋白相对表达水平降低,CTSK蛋白相对表达水平升高(P<0.05);与TNF-α诱导组比较,补骨脂素3个治疗组中除CTSK蛋白相对表达水平降低外,其他上述指标水平均升高(P<0.05);补骨脂素作用效果呈剂量依赖性(P<0.05).结论 补骨脂素可促进炎性环境下hPDLSCs成骨分化,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin轴下调CTSK蛋白表达有关.
文献关键词:
补骨脂素;炎性环境;人牙周膜干细胞;成骨分化;Wnt/β-catenin轴
中图分类号:
作者姓名:
崔蕾;司玲;武光杰;张栋;边百川;胡静;韩雪
作者机构:
河北省直属机关第二门诊部口腔科,河北石家庄050051
文献出处:
引用格式:
[1]崔蕾;司玲;武光杰;张栋;边百川;胡静;韩雪-.补骨脂素对炎性环境下人牙周膜干细胞成骨分化的影响及机制)[J].广东药科大学学报,2022(05):76-82
A类:
B类:
补骨脂素,炎性环境,人牙周膜干细胞,成骨分化,hPDLSCs,可能机制,酶消化法,有限稀释,稀释法,外分,流式细胞术,细胞表型,成脂,多向分化,分化能力,mL+,成骨诱导,诱导培养,培养液,碱性磷酸酶,ALP,检测试剂盒,qPCR,Runt,Runx2,锌指,Osx,骨桥蛋白,OPN,骨钙素,OCN,相对表达,blot,Wnt3a,连环蛋白,catenin,糖原合成,合成酶,GSK,磷酸化,组织蛋白酶,CTSK,白相,茜素红,比色分析法,分离培养,骨化,环境诱导,矿化,化钙,吸光度值,平降,剂量依赖,量依赖性
AB值:
0.239075
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