目的 基于骨保护蛋白(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/细胞核因子κB受体活化因子(RANK)通路探究Lnc-AK077216对破骨细胞(OC)分化成熟的调控作用.方法 取对数生长期RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,采用脂质体转染法将Lnc-AK077216-shRNA、Control-shRNA转染至RAW264.7细胞,分别设为转染组、空载组.另取未作处理细胞设为对照组.采用荧光显微镜观察转染率,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定转染后Lnc-AK077216 mRNA相对表达量;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测诱导分化7 d后的OC数及阳性染色面积;采用qRT-PCR检测诱导分化培养3 d后各组OPG、RANKL、RANK mRNA相对表达量;采用Western blotting检测诱导分化培养3 d后各组OPG、RANKL、RANK蛋白相对表达量.结果 转染48 h后,荧光显微镜显示转染效率>70％;转染48 h后转染组Lnc-AK077216 mRNA相对表达量低于对照组和空载组(P<0.05);诱导分化前RAW264.7细胞多呈圆形且形态规则,诱导分化7 d后经TRAP染色,可观察到呈阳性的多核巨细胞,细胞有伪足、突起,且体积较大,表明生成OC;转染组OC数少于对照组和空载组(P<0.05),阳性染色面积小于对照组和空载组(P<0.05);转染组OPG mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和空载组(P<0.05),RANKL、RANK mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组和空载组(P<0.05).结论 敲低Lnc-AK077216可抑制RAW264.7细胞向OC分化,其调控机制可能与上调OPG mRNA和蛋白表达,下调RANKL、RANK mRNA和蛋白表达有关.

Lnc-AK077216;骨保护蛋白;细胞核因子κB受体活化因子配体;细胞核因子κB受体活化因子;破骨细胞;分化

李坤;喻锋;余国庆;陈志龙;王晶

鄂州市中心医院 骨科,湖北 鄂州 436000

中国现代医学杂志

[1]李坤;喻锋;余国庆;陈志龙;王晶-.Lnc-AK077216基于OPG/RANKL/RANK通路对破骨细胞分化成熟的调控作用)[J].中国现代医学杂志,2022(11):51-56

AK077216

Lnc,OPG,RANKL,破骨细胞分化,分化成,骨保护蛋白,细胞核,核因子,活化因子,OC,对数生长期,RAW264,单核巨噬细胞,脂质体转染,shRNA,Control,空载,荧光显微镜观察,实时荧光定量聚合酶链反应,qRT,相对表达量,抗酒石酸酸性磷酸酶,TRAP,诱导分化,分化培养,blotting,白相,转染效率,呈圆形,形态规则,多核,巨细胞,伪足,突起,敲低,可抑制,调控机制

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