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典型文献
3种淡水鱼病原菌多重PCR检测方法的建立与应用
文献摘要:
根据辽宁地区常见淡水鱼病原菌嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、蜡样芽孢杆菌的相关毒力因子,选择特异性较强的嗜水气单胞菌的溶血素(hlyA)基因、迟钝爱德华氏菌的效应蛋白(eseD)基因、蜡样芽孢杆菌非溶血性肠毒素(nheA)基因为分子靶标,分别设计1对特异性引物,建立可同步检测3种菌的多重PCR检测体系.研究结果显示,在3个毒力基因引物浓度均为0.4μmol/L,模板质量浓度为2.5 ng/μL,dNTP和酶添加量分别为2.5μL和0.3μL,退火温度为55℃时,各目的片段均可较好地扩增.敏感性试验结果表明,建立的多重PCR对嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌和蜡样芽孢杆菌的最低检测量分别为4.8、3.0 ng和2.6 ng.对临床分离的菌株样本进行检测,与16S rDNA分子鉴定结果的符合率为100%.建立的多重PCR体系检测方法特异、灵敏、快速,可同步完成淡水鱼源的嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌和蜡样芽孢杆菌的检测.
文献关键词:
嗜水气单胞菌;迟钝爱德华氏菌;蜡样芽孢杆菌;多重PCR
作者姓名:
胡宗云;杨培民;闫有利
作者机构:
辽宁省淡水水产科学研究院,辽宁省水生动物病害防治重点实验室,辽宁 辽阳 111000
文献出处:
引用格式:
[1]胡宗云;杨培民;闫有利-.3种淡水鱼病原菌多重PCR检测方法的建立与应用)[J].水产科学,2022(04):605-613
A类:
eseD
B类:
淡水鱼,鱼病,建立与应用,辽宁地区,嗜水气单胞菌,迟钝爱德华氏菌,蜡样芽孢杆菌,毒力因子,溶血素,hlyA,效应蛋白,溶血性,肠毒素,nheA,分子靶标,特异性引物,同步检测,检测体系,毒力基因,dNTP,退火温度,敏感性试验,16S,rDNA,分子鉴定,符合率,法特
AB值:
0.210874
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