目的:探讨孕酮和骨化三醇抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞因子分泌的分子机制.方法:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞,检测细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1及CXCL2的mRNA水平,NF-κB亚基RelA、RelB、c-Rel、p50、p52蛋白水平.荧光素酶报告检测RelA启动子活性.高通量测序检测孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miRNA表达差异.过表达孕酮和骨化三醇共同调控的差异miRNA,检测RelA表达.结果:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后,细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2分泌水平和表达均显著降低(P<0.05),NF-κB亚基RelA表达下调,NF-κB亚基RelB、c-Rel、p50、p52表达无改变.孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞,RelA启动子活性变化差异无统计学意义(P>0.05),但RelA mRNA水平降低(P<0.05).孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后,有110种miRNAs表达上调,骨化三醇处理后有57种miRNAs表达上调,其中14种miRNAs两种处理后均上调.过表达两种处理后均上调的miRNAs,发现过表达miR-590-5p可降低NF-κB亚基RelA mRNA水平(P<0.05),且靶向NF-κB亚基RelA-3'端非编码区(P<0.05).此外,过表达miR-590-5p后RelA蛋白水平下降,敲低后NF-κB亚基RelA蛋白水平上升.过表达miR-590-5p后,细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达均显著降低(P<0.05),敲低后细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达均显著升高(P<0.05).但同时过表达或敲低miR-590-5p和RelA时,细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达无明显变化(P>0.05).结论:孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miR-590-5p表达升高,miR-590-5p靶向NF-κB亚基RelA-3'端非编码区,降低RelA蛋白水平,降低NF-κB复合体活性,最终下调细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达.本研究为孕酮和骨化三醇治疗子宫内膜癌的分子机制提供新依据,为孕酮和骨化三醇降低机体炎症反应提供理论依据.

miR-590-5p;子宫内膜癌;Ishikawa细胞;细胞因子;孕酮;RelA;骨化三醇

赵丽洁;赵慧;郭丹;林丽红

安阳职业技术学院,安阳455000;安阳市肿瘤医院妇产科,安阳455000

中国免疫学杂志

[1]赵丽洁;赵慧;郭丹;林丽红-.孕酮和骨化三醇通过miR-590-5p靶向RelA调控子宫内膜癌细胞Ishikawa的细胞因子分泌)[J].中国免疫学杂志,2022(11):1343-1348

RelB,p52

孕酮,骨化三醇,5p,RelA,子宫内膜癌细胞,Ishikawa,细胞因子分泌,别处,CXCL1,CXCL2,亚基,p50,荧光素酶,启动子活性,醇处理,表达差异,过表达,同调,泌水,活性变化,平降,miRNAs,非编码区,敲低,复合体,调细,机体炎症反应

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