目的 研究固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及Clara细胞分泌蛋白(CCSP)的影响,探讨其防治缓解期哮喘的可能机制.方法 联合使用卵清蛋白(OVA)及呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)建立哮喘缓解期小鼠模型,将36只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、固本防哮饮低剂量组、固本防哮饮中剂量组、固本防哮饮高剂量组和孟鲁司特钠组,每组6只.模型建立完成后,固本防哮饮各剂量组分别予不同剂量(12、24、36 g·kg-1)固本防哮饮,孟鲁司特钠组予2.6 mg·kg-1孟鲁司特钠,各组均灌胃28 d.末次给药后24 h留取样本.使用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肺组织病理;Western blot、qPCR及免疫组化检测各组小鼠肺组织中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)等气道上皮紧密连接蛋白表达;ELISA法检测肺组织及肺泡灌洗液(BALF)中CCSP的表达.结果 HE染色结果显示,与正常组相比,模型组小鼠肺组织中可见明显的炎性细胞浸润(P<0.01),固本防哮饮中、高剂量组小鼠肺组织中炎性细胞浸润减少(P<0.05,P<0.01);与正常组相比,模型组中ZO-1、闭合蛋白(Occludin)和桥粒芯胶蛋白(Desmocollin)的蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),免疫组化结果显示上述指标蛋白在模型组中表达减少(P<0.01,P<0.001)且排列松散,固本防哮饮各剂量组对上述蛋白表达有不同程度地回调;同时,模型组中ZO-1、ZO-2、纽带蛋白(Vinculin)、连环蛋白(Catenin)mRNA的表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),固本防哮饮高剂量组ZO-1、ZO-2、Vinculin、Catenin mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与正常组相比,模型组小鼠肺组织及BALF中CCSP的表达显著下降(P<0.01),低、高剂量固本防哮饮显著增加肺组织及BALF中CCSP的表达(P<0.05,P<0.01).结论 固本防哮饮能够上调气道上皮紧密连接蛋白以及CCSP的表达水平,修复上皮损伤,恢复上皮屏障功能,从而防治哮喘.

固本防哮饮;哮喘缓解期;上皮屏障;紧密连接蛋白;CCSP

姜越;张宇林;董盈妹;严花;赵霞

南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029;南京中医药大学中医儿科学研究所,江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室,江苏 南京 210023

南京中医药大学学报

[1]姜越;张宇林;董盈妹;严花;赵霞-.固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及CCSP的影响)[J].南京中医药大学学报,2022(06):483-489

Desmocollin

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