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培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导分化破骨细胞的影响
文献摘要：
目的 探讨培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响.方法 实验分为3组:高糖DMEM培养基组(DMEM组);高糖DMEM/α-MEM培养基组(DMEM/α-MEM组);α-MEM培养基组(α-MEM组).按常规方法采用上述3种培养基进行破骨细胞培养,培养5 d后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察各组破骨细胞的形成情况,并采用实时荧光定量PCR方法观察破骨细胞分化相关标志物NFATc-1、c-Fos和TRAF-6 mRNA的表达;培养11 d后采用甲苯胺蓝染色进行骨陷窝面积分析,观察破骨细胞骨吸收功能情况.结果 3组均可以观察到典型的TRAP+破骨细胞.与DMEM组相比,DMEM/α-MEM组、α-MEM组TRAP+破骨细胞数量明显增加(P<0.01),但各组形态略有不同.在骨吸收功能上,与DMEM组和DMEM/α-MEM组相比,α-MEM组骨陷窝面积明显增加(P<0.01).在破骨细胞分化相关调控因子表达上,与DMEM组相比,α-MEM组NFATc-1、c-Fos和TRAF-6 mRNA表达显著增加(P<0.01,P<0.05);DMEM/α-MEM组NFATc-1 mRNA表达显著增加(P<0.01),c-Fos和TRAF-6 mRNA表达有增加的趋势,但差异无统计学意义;α-MEM组与DMEM/α-MEM组比较差异无统计学意义.结论 高糖DMEM培养基、高糖DMEM/α-MEM培养基、α-MEM培养基均可用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导分化破骨细胞的实验;从破骨细胞数量、状态及功能来看,α-MEM培养基更适合做为破骨细胞分化培养基.
文献关键词：
破骨细胞;小鼠单核巨噬细胞RAW264. 7;高糖DMEM培养基;α-MEM培养基
中图分类号：
作者姓名：
刘昕;李圆圆;刘红;李艳;潘静华;王少君;赵宏艳
作者机构：
中国中医科学院医学实验中心 北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室,北京100700
文献出处：
引用格式：
[1]刘昕;李圆圆;刘红;李艳;潘静华;王少君;赵宏艳-.培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导分化破骨细胞的影响)[J].中国骨质疏松杂志,2022(10):1422-1427
A类：
TRAP+
B类：
单核巨噬细胞,RAW264,诱导分化,破骨细胞分化,高糖,DMEM,基组,常规方法,细胞培养,抗酒石酸酸性磷酸酶,tartrate,resistant,acid,phosphatase,相关标志物,NFATc,Fos,TRAF,甲苯胺蓝染色,骨吸收功能,细胞数量,略有不同,调控因子,能来,合做,做为,分化培养
AB值：
0.152815
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