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典型文献
寡聚核苷酸介导的基因突变技术创制抗除草剂烟草新种质
文献摘要:
为进一步优化烟草(Nicotiana tabacum)品种'K326'的种质,该研究采用寡聚核苷酸介导的基因突变(oligonucleotide-mediated mutagenesis,OMM)技术,利用植物中支链氨基酸合成途径中第一个关键酶——乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase,ALS)突变后烟草对氯磺隆除草剂不敏感且产生抗性的特征,以及NCBI报道的ALS基因序列同源克隆了烟草品种'K326'中的ALS基因,并根据ALS基因序列设计用于定点突变的RNA/DNA嵌合体,导入烟草品种'K326'创制对氯磺隆除草剂具有抗性的烟草新种质.结果表明:(1)烟草品种'K326'具有2条ALS基因,即ALS SuRA和ALS SuRB,大小分别为2004 bp和2010 bp.(2)根据2个基因的保守位点ALS SuRA 588脯氨酸位点和ALS SuRB 1719色氨酸位点设计用于ALS基因核苷酸第588位点的Chl-588嵌合体和第1719位点的Chl-1719嵌合体.(3)利用基因枪成功将这2个片段导入烟草愈伤组织,愈伤组织依次经抗性芽分化和生根,共获得氯磺隆抗性植株22株.(4)抗性植株ALS酶活性测定显示,8株抗性植株具有较强的活性,进一步对抗性植株中跨突变位点保守扩增、测序,最终确定有2株(f11和b18)分别在588、1719位点产生定点突变.综上认为,该研究在获得烟草品种'K326'抗氯磺隆新种质同时,也为培育抗性烟草新种质提供了理想的亲本材料.
文献关键词:
烟草;ALS基因;除草剂抗性;氯磺隆;OMM技术
作者姓名:
谢宇峰;秦利军
作者机构:
贵州大学农业生物工程研究院/ 山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室/ 生命科学学院, 贵阳550025
文献出处:
引用格式:
[1]谢宇峰;秦利军-.寡聚核苷酸介导的基因突变技术创制抗除草剂烟草新种质)[J].广西植物,2022(09):1551-1560
A类:
SuRA,SuRB,b18
B类:
寡聚,基因突变,创制,抗除草剂,新种质,Nicotiana,tabacum,K326,oligonucleotide,mediated,mutagenesis,OMM,中支,支链氨基酸,氨基酸合成,合成途径,关键酶,乙酰乳酸合成酶,acetolactate,synthase,ALS,氯磺隆,不敏,NCBI,基因序列,同源克隆,烟草品种,序列设计,定点突变,嵌合体,bp,保守位点,脯氨酸,酸位点,色氨酸,Chl,基因枪,愈伤组织,共获,植株,酶活性测定,对抗性,中跨,突变位点,f11,亲本,除草剂抗性
AB值:
0.29513
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