典型文献
新型miRNA表达框架下调端粒酶活性并抑制视网膜母细胞瘤细胞生长
文献摘要：
目的 本研究致力于设计一种新的miRNA表达框架(MEC),其以hTERT和hTR的特异性序列为靶点.该框架能够有效改善传统RNAi方法中miRNA易降解和细胞毒性问题,为miRNA的合成提供一种简便的方法.方法 采用重叠PCR方法构建hTERT和hTR特异的miRNA表达框架.采用TRAP银染色和TRAP实时荧光定量PCR检测端粒酶活性.实时荧光定量PCR法测定端粒长度,MTT法测定细胞活力.annexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,PI单染色法检测细胞周期,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 成功构建了靶向hTERT/hTR特异性miRNA表达框架.不同MEC对端粒酶活性的抑制程度不同.端粒酶的沉默可引起视网膜母细胞瘤(RB)细胞G0/G1期生长阻滞,导致细胞凋亡.结论 miRNA介导的端粒酶沉默是一种有效抑制RB细胞生长的策略,开发一个强大的系统来充分探索miRNA的作用是必要的.本文构建的MEC显示了强大的RNAi效应,可成为筛选用于RB基因治疗的RNAi靶向序列的有效工具.
文献关键词：
端粒酶;miRNA;RNAi;视网膜母细胞瘤;基因治疗
中图分类号：
作者姓名：
赵丹丹;丁彩云;李文涛
作者机构：
山西医科大学附属山西眼科医院,太原030002;山西医科大学附属山西省人民医院中心实验室,太原030001;太原科技大学,太原030024
文献出处：
引用格式：
[1]赵丹丹;丁彩云;李文涛-.新型miRNA表达框架下调端粒酶活性并抑制视网膜母细胞瘤细胞生长)[J].生物化学与生物物理进展,2022(12):2428-2439
A类：
hTR,annexinV
B类：
miRNA,表达框架,端粒酶活性,视网膜母细胞瘤细胞,细胞生长,MEC,hTERT,特异性序列,RNAi,细胞毒性,TRAP,银染,端粒长度,MTT,细胞活力,染色法,细胞周期,流式细胞仪,制程,RB,G0,G1,基因治疗
AB值：
0.189176
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