目的 PAMM(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes)是近年来发现的一种在脂肪组织中高表达的分泌因子,但其生物学功能尚不完全清楚.为了给PAMM功能研究提供新线索,本文探讨了PAMM在白色脂肪生成中的可能作用及PAMM调节的下游基因.方法 利用成脂分化液或"成脂分化液+IL-lα"建立人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的成脂分化和成脂抑制模型.用siRNA干扰和过表达质粒转染的方法抑制或上调PAMM表达水平.采用基因芯片、mRNA测序及定量RT-PCR检测基因的mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法评价蛋白质表达水平,用油红O染色检测脂滴沉积.结果 随着ADSCs向白色脂肪分化,PAMM表达水平明显上升,而随着成脂抑制,PAMM表达明显下降.在ADSCs中沉默或过表达PAMM后,再进行成脂分化.结果 发现,上调或下调PAMM对脂滴形成及成脂相关基因的表达均无明显影响.类似地,在高度分化的脂肪细胞中敲低PAMM表达,对细胞形态及脂滴含量亦无明显影响.本文进一步利用siRNA干扰、mRNA测序及qRT-PCR,筛选和验证了一批受PAMM调节的下游基因及功能性基因集,包括SULF1、A2M基因及调节P53稳定性的基因集等.结论 PAMM可作为白色成脂分化的标志基因,但其自身对白色脂肪细胞生成无明显影响,本研究筛选出来的PAMM下游基因及基因集,可为进一步研究PAMM的功能提供新线索.

PAMM;脂肪细胞;成脂分化;干细胞;脂肪因子

张明萌;王颖;梁杰;吴洪福;史玉仓;吴志远;饶敏腊;彭健愉;蒋智文;刘新光;孙雪荣

广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室衰老研究所,东莞523808;青岛市市立医院集团输血医学科,青岛266011;广东医科大学第二临床医学院,东莞523808;广东医科大学附属医院整形外科,湛江524001;广东医科大学干细胞与再生组织工程重点实验室,东莞523808;广东医科大学生物化学与分子生物学研究所,湛江524023

生物化学与生物物理进展

[1]张明萌;王颖;梁杰;吴洪福;史玉仓;吴志远;饶敏腊;彭健愉;蒋智文;刘新光;孙雪荣-.PAMM不影响人脂肪干细胞的成脂分化能力)[J].生物化学与生物物理进展,2022(07):1305-1317

A2M

PAMM,人脂肪干细胞,成脂分化,分化能力,peroxiredoxin,like,activated,CSF,stimulated,monocytes,脂肪组织,生物学功能,功能研究,新线,脂肪生成,+IL,立人,adipose,derived,stem,cells,ADSCs,siRNA,过表达质粒,质粒转染,基因芯片,蛋白质印迹法,蛋白质表达水平,用油,脂滴,脂肪分化,似地,敲低,细胞形态,qRT,SULF1,P53,标志基因,白色脂肪细胞,脂肪因子

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