目的 探讨热补针法治疗类风湿关节炎(RA)寒证的抗炎机制.方法 采用卵蛋白干粉、弗氏完全佐剂联合低温冷冻法制备RA寒证家兔模型.按随机数字表法将50只家兔(雌雄各半)随机分为正常组、模型组、瑞沙托维(TAK-242)组、热补针法组及脂多糖(LPS)联合热补针法组,每组10只.TAK-242组腹腔注射Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242(0.75 mg/kg),热补针法组于"足三里"行热补针法针刺,LP S联合热补针法组行热补针法针刺合腹腔注射TLR4激动剂LP S(0.25 mg/kg).连续治疗14 d后,比较各组家兔膝关节周径、皮肤温度;HE染色法观察家兔膝关节滑膜组织形态学;免疫组化法检测各组家兔膝关节滑膜组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达水平;Western blotting法检测各组家兔膝关节滑膜组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、丝裂原活化蛋白激酶1/2(ERK1/2)的蛋白表达水平;实时荧光PCR检测各组家兔哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)mRNA的表达.结果 与模型组比较,各干预组家兔膝关节周径缩小、皮肤温度升高(P<0.01);HE染色法示,TAK-242组及热补针法组家兔膝关节关节囊内侧黏膜基本平整,血管翳增殖减轻,存在少量炎性细胞浸润,而LP S联合热补针法组关节囊内侧黏膜粗糙,血管翳增殖,炎性细胞浸润聚集明显;滑膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6平均光密度均降低(P<0.01);TLR4、MyD88、ERK1/2蛋白表达水平及mTOR、p70S6K mRNA表达水平均降低(P<0.01).与LPS联合热补针法组比较,热补针法组及TAK-242组家兔膝关节周径缩小、皮肤温度升高(P<0.01);滑膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6平均光密度均降低(P<0.01);TLR4、MyD88、ERK1/2蛋白表达水平及mTOR、p70S6K mRNA表达水平均降低(P<0.01).结论 热补针法可以有效改善RA寒证家兔模型膝关节肿胀,缓解炎症反应,其机制可能与抑制滑膜组织TLR4-MyD88-ERK1/2通路,拮抗细胞增殖活性,减少炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌有关.

类风湿关节炎;热补针法;Toll样受体4;髓样分化因子88;丝裂原活化蛋白激酶1/2;家兔

苏成红;杜小正;方晓丽;刘强;刘莉梅;袁博;井维尧;张小娜;宋亚文

甘肃中医药大学针灸推拿学院 兰州730000;甘肃中医药大学附属医院郑氏针灸科

北京中医药大学学报

[1]苏成红;杜小正;方晓丽;刘强;刘莉梅;袁博;井维尧;张小娜;宋亚文-.热补针法对类风湿关节炎寒证家兔模型膝关节滑膜组织TLR4-MyD88-ERK1/2信号通路的影响)[J].北京中医药大学学报,2022(07):745-754

热补针法,类风湿关节炎,寒证,家兔模型,滑膜组织,TLR4,MyD88,ERK1,RA,抗炎机制,卵蛋,白干,干粉,弗氏完全佐剂,低温冷冻,冷冻法,雌雄,各半,TAK,脂多糖,LPS,腹腔注射,Toll,样受体,足三里,针刺,激动剂,皮肤温度,HE,染色法,观察家,兔膝关节滑膜,组织形态学,免疫组化法,blotting,髓样分化因子,丝裂原活化蛋白激酶,蛋白表达水平,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,mTOR,核糖体蛋白,p70S6K,关节囊,血管翳,炎性细胞浸润,平均光密度,膝关节肿胀,抗细胞增殖活性,炎性因子

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