目的 对运用流式细胞术检测精子线粒体膜电位(MMP)中的影响因素进行初步研究.方法 对精子MMP的流式细胞检测技术进行重复性分析后,随机选取符合MMP检测要求的精液样本,观察样本放置时间、温度、样本保存液及冷冻等因素对MMP检查结果的影响.结果 高、中、低MMP的精液样本使用流式细胞术重复检测10次,所得CV均低于7％;随着样本放置时间延长,精子MMP逐渐下降,与放置30 min(43.31±13.96)相比,放置2 h后MMP显著降低(35.44±17.23,P＜0.05).不同样本的个体差异导致MMP的下降幅度存在差异;样本存放的温度:精液样本于2～8℃冷藏放置相较室温避光保存样本MMP下降幅度少,但是无统计学差异(P＞0.05);精液样本添加自制样本保护液于2～8℃冷藏后,精子MMP显著高于无保护剂添加的样本(P＜0.05),MMP下降速度明显减缓.精液样本1∶1添加冷冻保护剂后置于-20℃冷冻会对精子MMP造成显著损伤(P＜0.01).结论 MMP检测中,样本放置时间对MMP的检测结果有着较大的影响,最好在精液液化后半小时内完成检测.为了提高实验室的质量控制及工作效能,可将样本置于样本保存液中冷藏并在2小时内完成检测.冷冻精液样本无法作为精子MMP检测的室内质控品.

精子;线粒体膜电位;流式细胞术;不育;男性

李智新;沈嘉铭;徐健;颜宏利;李维杰

上海理工大学生物系统热科学研究所 上海 200093;中国人民解放军海军军医大学第一附属医院 上海 200433

中国男科学杂志

[1]李智新;沈嘉铭;徐健;颜宏利;李维杰-.流式细胞术检测精子线粒体膜电位影响因素分析)[J].中国男科学杂志,2022(02):3-6,14

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