目的 探究雷公藤红素(celastrol,CEL)通过靶向抑制STAT3发挥抗结肠癌作用.方法 体外培养HCT-116细胞、HepG2细胞、A549细胞,经不同浓度的CEL处理,CCK-8检测体外抗增殖活性;选择HCT-116细胞,利用Western blot检测给药前后STAT3及其上下游蛋白(JAK2、Survivin、MCL-1)的表达;应用表面等离子共振(SPR)以及分子对接技术分析CEL与人源STAT3重组蛋白(rhSTAT3)的结合;采用流式细胞仪检测HCT-116细胞凋亡与细胞周期阻滞情况;建立4例患者来源的结直肠肿瘤类器官(colorectal cancer organoid,CCO)模型(CCO-1、CCO-2、CCO-3、CCO-4)和1例正常结直肠组织类器官模型(colorectal normal organoid,CNO),评价化合物对CCOs和CNO的抑制作用.结果 CEL对3种肿瘤细胞的半数抑制浓度分别为(A549:IC50=2.37±0.02μmol·L-1、HCT-116:IC50=1.40±0.21μmol·L-1、HepG2:IC50=2.52±0.02μmol·L-1);HCT-116细胞经IL-6诱导后各蛋白水平均有明显的升高,差异具有统计学意义(P<0.05),CEL给药6 h后,使磷酸化信号转导及转录激活因子(p-STAT3)、细胞凋亡相关蛋白(Survivin、MCL-1)的表达量下调(P<0.05),对STAT3总蛋白以及磷酸化酪氨酸激酶(p-JAK2)的表达量无明显影响(P>0.05);CEL能够阻滞HCT-116细胞周期并诱导细胞凋亡;SPR分析CEL与rh-STAT3蛋白的平衡解离常数KD=6.038×10-5 mol·L-1,具有良好的结合力,分子对接预测其结合位点位于STAT3的SH2结构域;CEL抗结直肠癌活性在CCOs上得到进一步验证,且作用强于阳性药奥沙利铂(L-OHP).结论 CEL具有显著的抗肿瘤活性,其可能是通过直接靶向抑制STAT3,进而诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期来发挥抗结直肠癌作用.

雷公藤红素;结直肠癌;STAT3;分子对接;SPR;肿瘤类器官

范若兰;陈海兰;赖斌;李志利;徐伟;严国鸿;许少华;樊志敏

福建中医药大学药学院,福建省中药资源研究与开发利用重点实验室,福建 福州 350122;南京中医药大学附属南京中医院,江苏 南京 210022;福建中医药大学附属人民医院,福建 福州 350004

中国药理学通报

[1]范若兰;陈海兰;赖斌;李志利;徐伟;严国鸿;许少华;樊志敏-.雷公藤红素靶向抑制STAT3抗结直肠癌的机制)[J].中国药理学通报,2022(11):1673-1680

rhSTAT3,CCOs

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