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鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法的建立
文献摘要:
为建立鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体的间接ELISA检测方法,应用原核表达的IBDV VP2蛋白作为包被抗原,经方阵试验确定间接ELISA试验的最佳反应条件:包被抗原的浓度为8μg/mL,标准阴、阳性血清的稀释度为1:400,封闭液选用10%马血清,酶标抗体最佳稀释倍数为1:15000,最佳抗原稀释液为0.01 mol/L PBS(pH7.2),抗原最佳包被条件为4℃过夜,待检血清和酶标二抗反应条件为37℃60 min,底物作用时间为15 min.待检血清的OD450nm≥0.288判为阳性,反之判为阴性.结果显示,该方法的特异性好、敏感高、重复性好.用建立的间接ELISA方法与商品化IDEXX-ELISA试剂盒对临床血清样品进行检测,符合率为95.7%.该方法的建立为检测IBDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、方便经济的检测方法,为鸡传染性法氏囊病免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段.
文献关键词:
鸡传染性法氏囊病病毒;抗体;VP2;间接ELISA
中图分类号:
作者姓名:
黄小洁;吴华伟;张兵;杨承槐;孔冬妮;侯力丹;杨飞;薛麒;刘丹
作者机构:
中国兽医药品监察所,北京100081;中牧实业股份有限公司,农业部兽用生物制品与化药重点实验室,北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心,北京100095
文献出处:
引用格式:
[1]黄小洁;吴华伟;张兵;杨承槐;孔冬妮;侯力丹;杨飞;薛麒;刘丹-.鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法的建立)[J].中国兽药杂志,2022(09):14-21
A类:
B类:
鸡传染性法氏囊病病毒,IBDV,原核表达,VP2,包被抗原,经方,方阵,反应条件,阳性血清,封闭液,倍数,稀释液,PBS,pH7,过夜,底物,作用时间,OD450nm,判为,反之,商品化,IDEXX,试剂盒,清样,符合率,立为,免疫监测,预防控制
AB值:
0.301777
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