目的 探究慢性间歇性低氧(CIH)通过血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-AngⅡ1型受体(AT1R)对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞迁移的影响以及相关机制.方法 将20只小鼠随机分为常氧对照组(10只)和CIH组(10只).用常氧和CIH处理后的LLC细胞皮下成瘤小鼠血清配制成完全培养基来培养LLC细胞,检测LLC细胞形态.Transwell检测不同处理方法对LLC细胞迁移的影响;蛋白质印迹法检测LLC细胞迁移相关信号蛋白水平的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血清与LLC细胞培养基上清中AngⅡ水平.结果 ELISA结果显示,CIH组小鼠血清中AngⅡ的水平升高,t=13.948,P=0.008.不同处理方法小鼠血清培养LLC细胞结果显示,CIH组小鼠血清促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样.Transwell结果显示,Losartan拮抗CIH组小鼠血清对LLC细胞迁移有促进作用,CIH的主效应为F=22.667,P=0.001,Los的主效应为F=29.706,P=0.001,CIH与Los二者间存在交互拮抗效应,F=10.303,P=0.012.用AngⅡ处理LLC细胞后发现,AngⅡ促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样,Transwell结果显示,AngⅡ以浓度依赖性的方式促进LLC细胞迁移,F=42.497,P=0.003.AngⅡ以及AngⅡ联合使用AT1R拮抗剂Losartan处理LLC细胞,Transwell结果显示,Losartan拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用,F=53.432,P<0.001;蛋白质印迹结果显示,Losartan拮抗AngⅡ对vimentin(F=77.819,P=0.001)、MMP 2(F=49.363,P=0.001)、β-catenin(F=23.847,P<0.001)和p-Akt/Akt(F=58.608,P=0.007)水平有促进作用.AngⅡ以及AngⅡ联合使用PI3K阻断剂LY294002处理LLC细胞后,Transwell结果显示,LY294002拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用,F=52.792,P=0.002;蛋白质印迹结果显示,LY294002拮抗AngⅡ对vimentin(F=94.231,P=0.032)、MMP 2(F=48.612,P=0.020)、β-catenin(F=46.037,P<0.001)和p-Akt/Akt(F=19.644,P=0.002)水平有促进作用.进一步给予LLC细胞间歇性低氧(IH)以及IH联合Losartan处理,ELISA结果显示,IH提高LLC细胞培养基上清液中AngⅡ水平,t=5.022,P<0.001;Transwell结果显示,Losartan拮抗IH对LLC细胞迁移有促进作用,IH的主效应为F=84.587,P<0.001,Los的主效应为F=92.102,P<0.001,IH与Los二者的交互拮抗效应,F=70.097,P<0.001;蛋白质印迹结果显示,Losartan拮抗IH对vimentin(F=49.382,P=0.002)、β-catenin(F=61.919,P=0.002)、MMP2(F=14.132,P<0.001)和p-Akt/Akt(F=100.038,P=0.013)水平有促进作用.结论 CIH通过AngⅡ-AT1R激活PI3K/Akt信号通路促进LLC细胞迁移.

慢性间歇性低氧;血管紧张素Ⅱ;血管紧张素Ⅱ1型受体;LLC细胞;迁移

赵贞;李超红;赵宝生;刘玉珍

新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心,河南 新乡 453100;新乡医学院第一附属医院胸外科,河南 新乡 453100;新乡医学院食管癌研究所,河南 新乡 453100

中华肿瘤防治杂志

[1]赵贞;李超红;赵宝生;刘玉珍-.慢性间歇性低氧通过AngⅡ-AT1R激活PI3K/Akt促进LLC细胞迁移研究)[J].中华肿瘤防治杂志,2022(16):1184-1193

Losartan

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